1. 研究目的与意义
灰葡萄孢（Botrytis cinerea）属于半知菌亚门、葡萄属的一种植物病原真菌，由它引起的灰霉病已经成为了世界性病害，灰葡萄孢的寄主范围十分广泛、危害非常严重。这种病菌腐生性很强，能够侵染约200种植物，如番茄、大豆、黄瓜、草莓等蔬菜、果树以及观赏性植物的各个部位。灰霉病发病时表现为植物幼苗猝倒、落叶、落花和果实腐烂，最终给农业生产等经济方面带来巨大的经济损失。灰霉病是目前我国温室蔬菜生产上最主要的病害之一，一般会造成减产20%-25%，严重时达到40%以上。该病原菌菌源复杂，遗传变异大、适应能力强，属于高风险病菌，很容易产生抗药性病株。
本研究以研究基因Bct3983在灰葡萄孢生长过程中分子水平上的作用机理为目的，分析了解在分子水平上对灰葡萄孢的发育与致病性的机理进行深入的研究，并与本研究有关的国内外最新研究相比较，了解发展趋势，分析存在问题，将为制定持久控制灰霉病的策略提供理论依据和实践基础。
2. 国内外研究现状分析
灰霉病已经是一个世界性的病害存在，它分布全球，对蔬菜、果树和观赏性植物的影响巨大，就番茄而言，被灰葡萄孢侵染后，就会出现不同程度的减产，严重时甚至会绝收。至今为止，国内外的主要从灰霉病病菌的生物学、发病规律、病害流行以及病害防治等方面进行研究，从中了解灰霉病的特点以及发病机制等。但是在病害的分子机制方面研究比较少，这阻碍了提高灰霉病的防治技术，也限制了深入了解灰葡萄孢的侵染过程与致病机制。因此，从分子水平上对灰葡萄孢的生长、发育、萌芽与致病性机理的研究，将为抑制防治灰霉病的策略提供理论依据和实践基础。
2.1 国内研究概况
我国对灰霉病菌的研究，有一部分集中在对番茄灰霉病的抑制和防治中。番茄易灰霉病感染，从而遭受到破坏。通过测定中药细辛的乙醇提取物对番茄灰霉病菌室内抑菌作用和对番茄灰霉病的温室防治效果，结果表明了细辛提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用均与浓度呈正相关。在一次偶然事件中发现了戊烷脒对草莓灰霉病（botrytis cirerea）的抑制活性，随即通过一系列的室内外试验对这一发现进行了验证，结果表明戊烷脒对灰霉病的防治效果好，有开发成农用杀菌剂的可能。在喜树叶乙醇提取物对15种植物病原菌的抗菌活性研究中，随着提取物浓度升高，对各种植物病原菌的抑制率呈上升趋势，且对黄瓜菌核病菌、苹果腐烂病和番茄灰霉病抑制作用较强。
3. 研究的基本内容与计划
3.1 研究内容
3.1.1主要内容
借助peg介导的灰葡萄孢表达系统，对灰葡萄孢中bct3983基因克隆和生物学功能进行了初步的功能分析。对遗传体系的关键参数和性能指标进行优化和探讨，并进行验证。分别对突变菌株的表型观察及生长速率、致病性、毒素活性、细胞胞壁降解酶活力进行测定，同时对部分致病相关基因进行表达检测。
4. 研究创新点
灰葡萄孢会感染多种树木、花草和蔬菜，它会导致农作物大面积歉收，植物生长不良，对人类的经济发展影响很大。
目前，灰霉病的防治仍然是一大难题，国内外对于病菌发育的分子机制方面的研究报道较少。
peg介导法，是遗传转化的一种方法，它有利于细胞间融合和外源dna分子进入原生质体，而且这种方法操作更加简洁。
