1. 研究目的与意义
松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）是国际上公认的重要检疫性有害生物，它引起的松树萎蔫病(Pine Wilt Disease)是一种毁灭性森林病害，目前在国内外都造成了重大的经济损失和生态破坏，然而，关于松材线虫的致病机理目前尚不完全明确。细胞自噬（Autophagy）是对维持真核生物健康有关键作用的一类亚细胞降解途径，它的生物学功能不断被探究，在生物体生长发育、免疫防御、细胞程序性死亡及神经性病变抑制等方面有非常重要的作用，近年来成为研究的热点。本重点实验室前期研究通过透射电镜观察到了饥饿状态下的松材线虫的细胞自噬现象，包括自噬小体、自噬溶酶体等标志自噬形成的结构；克隆了松材线虫中BxATG1和BxATG8两个自噬相关基因并进行了功能验证，发现自噬基因对松材线虫的生长发育有一定影响。那么松材线虫中是否还存在其它自噬相关基因呢？如果存在，这些基因在进化上处于什么位置？又具有怎样的结构和功能呢？本研究拟通过克隆多个松材线虫细胞自噬相关基因的全长，并进行系统分析，以期解决上述问题，为松材线虫细胞自噬的深入研究奠定坚实的基础，研究结果对深入了解细胞自噬的机制也有推进的作用和意义，并为松材线虫生长发育和致病机理的研究提供了新的切入点。
2. 国内外研究现状分析
1.松材线虫自噬相关基因bxatg5和bxatg9全长的克隆（2017.12-2018.02）
（1）松材线虫的培养与分离
（2）松材线虫rna的提取与cdna的合成
3. 研究的基本内容与计划
1. 松材线虫病研究概况
1.1 松材线虫病发生概况
松材线虫( bursaphelenchus xylophilus)，是一种可引起松树毁灭性死亡的重要检疫性有害生物。由其引发的松树萎蔫病是世界性的森林病害。可危害70种针叶树，其中松属树种57种，非松属植物13种[1]，由于此类病害具有易传播、发病速度快、致死率高、防治困难等特点，常被称为松树的癌症[2]。目前，该病仅分布于北美洲的美国、加拿大和墨西哥，东亚的中国、日本、韩国、朝鲜，欧洲的葡萄牙等国家，但是全球有52个国家将其作为检疫性病虫害[3]。然而，在北美洲此类病害并未对松林造成很大威胁，而在中国、日本等地区引起了松树的大量死亡，在经济和生态上造成了巨大损失。
4. 研究创新点
研究松材线虫的细胞自噬有助于进一步揭示松材线虫的致病机理，在其他物种中的研究发现ATG5和ATG9这两个自噬相关基因不仅参与细胞自噬过程的调控，也影响着生物的特性，但在松材线虫中尚未发现这两个重要的自噬相关基因，克隆分析松材线虫的这两个基因将为松材线虫细胞自噬的深入研究奠定坚实的基础。
