拟松材线虫致病性研究开题报告

 2021-08-08 21:40:01

1. 研究目的与意义

桂花(OsmanthusfragransLour.)是木犀科(Oleaceae)木犀属植物,是我国传统十大名花之一。具有极强的观赏性,又有巨大的药用价值。在江苏省城市有害生物调查时发现,在桂花的叶片上出现一种新的病害,严重影响桂花的观赏价值。对该病害进行研究具有重要的理论与实践意义。

2. 国内外研究现状分析

桂花原产中国,分布广泛,除了中国西南部、四川、陕南、云南、广西、广东等地区,印度,尼泊尔,柬埔寨也有分布。我国的桂花种质资源极其丰富、多样,有不少种和品种具有较高的观赏、经济价值。洪海林、施仕胜(2004)记载了湖北咸宁常见桂花病害主要有叶斑病、腐烂病、炭疽病、介壳虫、刺蛾、吉丁虫、粉虱、卷叶蛾、尺蠖等。根据对此次采集桂花叶片叶部病斑分离的初步研究,判断其为一种细菌性病害。细菌是一类有细胞壁但无固定细胞核的单细胞原核生物。据调查,迄今已知的由细菌引起的病害在 500 种以上,其危害程度仅次于真菌和病毒。而桂花叶部病害严重影响其观赏价值和药用价值,不容小视。研究桂花叶部的病害,可以先利用柯氏法则确定致病菌,根据采集发病的桂花叶片,从优势植株病部分离出致病菌,进行编号,将其纯化培养后,接种到健康叶片上,设置空白试验进行对照,观察其发病特性,若与原植株一样,即为致病菌,在根据其形态学特性进行进一步鉴别,通过对病原菌的菌体形态和大小,鞭毛的有无、着生位置及数目,培养性状,生理生化特性,16Sr DNA 序列等方面的分析进行判别,根据此方法,南楠(2014)将独角莲细菌性软腐病和水飞蓟细菌性软腐病的病原菌鉴定为Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum,菘蓝细菌性缘枯病的病原菌鉴定为 Erwinia rhapontici,当归细菌性叶斑病的病原菌鉴定为 Erwinia rhapontici,红花细菌性顶枯病的病原菌鉴定为 Pseudomonas syringaepv. syringae,红花细菌性黑茎病的病原菌鉴定为Pseudonomas cichorii。这六种病害在国内尚未见报道,桂花病害的鉴定也可参照此种方法,通过将分离出的优势菌在 PSA 上 25℃恒温培养一段时间,待菌落长满培养皿后,观察其菌落形态,包括菌落的形状、颜色、气味等。挑取少量菌丝制作临时玻片,显微镜下观察并记录其形态特征,参照真菌鉴定手册,结合其它特征做出鉴定。也可通过Biolog细菌鉴定系统进行鉴定,该系统快速、相对准确且标准化程度高,是根据细菌鉴定对种碳源的利用情况,将结果经计算机处理后并与数据库内己知的细菌比较,实现对待测菌的快速鉴定及检测。但其结果受数据库中数据数量大小的影响。Biolog细菌鉴定系统需对病原菌先进行分离,并且需要包含众多病原菌信息的数据库作为分析平台,所以在应用中具有一定的局限性。但是目前也不失为鉴定的一种好方法。目前已有卢伟(2013)提出桂花叶部病害病原菌为葡萄座腔菌(Botryospaeria dothidea)。该病原菌是否为此病害病原有待检验。

3. 研究的基本内容与计划

1、2016.02.22―2016.03.07:查阅文献,做预备实验;

2、2016.03.08-2016.03.22:分离桂花叶斑病病菌,初步确定可能的致病菌;

3、2016.03.23-2016.04.15:将可能的致病菌接种到桂花健康叶片上;

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4. 研究创新点

研究桂花叶部的病害,有利于提高桂花的药用价值和观赏价值,同时也对我国细菌性病害鉴定作了补充,为细菌性病害的深入研究提供理论依据。

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