1. 研究目的与意义
随着蛋白质组学研究的发展，已被广泛地应用到植物学研究中。基于胶的植物蛋白质学研究中，蛋白质提取是蛋白质组学研究的第一步，也是关键的一步。蛋白质提取的质量直接影响着后期蛋白质的分离和鉴定。由于植物蛋白质的复杂性和多样性，目前仍没有一种适合所有植物组织、器官的提取方法。尤其是植物组织中蛋白质含量低，且含有大量的酚类化合物、色素、蛋白酶、脂类、多糖和一些次生代谢物质，这些物质干扰的蛋白质的双向电泳分离和后期蛋白质的鉴定。因此，目前仍没有一种方法可以提取特定样品中所有的蛋白质。但是一个重复性高、质量高、纯度高的蛋白质提取方法是植物蛋白质组学分析的首要的。
2. 国内外研究现状分析
近年来主要的蛋白质组学技术的改进导致他们在所有生物领域的应用大量增加,其中包括在植物科学方面。对于所有蛋白质组学方法,蛋白提取和样品制备是获得最佳结果的前提。然而,从植物组织提取蛋白质仍是一个巨大的挑战。植物组织通常包含相对较低的蛋白质和高浓度的蛋白酶和化合物，可能会限制组织瓦解和干扰后续的蛋白分离和鉴定。因此，一个有效的蛋白质提取方法必须是适应大量次生代谢物和潜在的污染物质之间的组织(如叶、根、果实、种子和茎)和物种之间的变化。在这方面，国内外学者进行了多方面的尝试。
carpentier等2005年研究了从顽固的植物组织中提取的蛋白质并评估了四种方法：经典的三氯乙酸(tca)/丙酮沉淀法、柠檬酸/丙酮沉淀和分离,分馏法和苯酚萃取甲醇/醋酸铵沉淀法。该实验应用了香蕉、土豆和苹果三种植物，结果证明只有古典tca/丙酮沉淀法和苯酚萃取方法是有用的标准方法。这两种方法都与一个小但可再生的损失蛋白质有关。每个提取方法和随后的分析方法有其物理化学限制;这两种方法应该在结果调查之前,选择一个合适的协议。这项研究有助于许多非典型性特别是包含许多干扰因素的物种的实验的设计工作。
2006年，isaacson等在sampleextractiontechniquesforenhancedproteomicanalysisofplanttissues一文中提出两种基本的蛋白分离方法,已经成功地使用不同的植物组织,包括顽固的组织。第一种方法是基于苯酚萃取加上醋酸铵沉淀,第二种是基于三氯乙酸(tca)的沉淀。
3. 研究的基本内容与计划
内容：比较种子蛋白质提取：方法如三氯乙酸/丙酮沉淀法，酚抽提/醋酸酸铵沉淀法，酚抽提/三氯乙酸/丙酮组合式法
计划：分别就几种常用的蛋白质提取方法进行比较，选取其中2-DE图谱最有代表性的用于下一步实验。
4. 研究创新点
完善蛋白质提取技术，找到适用于杉木种子蛋白质的提取方法。
