1. 研究目的与意义
由于松材线虫与拟松材线虫亲缘关系极为相近，是否能进行种间杂交并出现杂交后代的问题很早就引起了人们的重视。
本实验室的试验表明其供试的不同国家的松材线虫均能和拟松材线虫发生杂交且杂交率较高，虽然杂交后代的活力较低，死亡率较高，但接种结果表明，部分活力强的杂交后代能在松苗内繁殖后代，对松苗存在一定的致病性。
然而在树体内松材线虫与拟松材线虫能否杂交还没有人进行探究，本实验选取浙江松材线虫与中国拟松材线虫进行树体内杂交，并使用分子技术标记杂交体，旨在探究松材线虫与拟松材线虫在树体内杂交的可能性。
2. 国内外研究现状分析
南京农业大学的季宏铁（2004）收集了包括中国、美国、俄罗斯、加拿大、日本等多个国家松材线虫株系与拟松材线虫株系进行两两种间杂交，其中4个组合可产生具有可育能力后代。
刘伟、杨宝君（1994）等他们收集了来自南京、四川和法国、日本、加拿大等地的松材线虫和拟松材线虫共10个株系，用中国不同株系的松材线虫和拟松材线虫与其他国家的不同株系的松材线虫和拟松材线虫进行种间杂交试验并做遗传分析，试验结果表明：中国的松材线虫和拟松材线虫能成功的杂交并有f2代和f3代等后代出现，但后代数量少且后代通常出现不育现象。
最后，他们得出的结论是松材线虫和拟松材线虫虽然在人工实验条件下能杂交成功，但由于种间杂交后代数量少且不能连续繁殖下去等因素的存在，所以他们认为在自然条件下中国的松材线虫不会通过与拟松材线虫的杂交而导致疫区扩大。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容1、松材线虫与拟松材线虫的扩大培养2、松材线虫与拟松材线虫在树体内杂交3、杂交后代分子标记研究研究方法1、松材线虫与拟松材线虫的扩大培养将供试线虫接种到长满灰葡萄孢的pda培养基上，在25℃培养箱中恒温培养5-8d。
之后用贝尔曼漏斗法将培养好的线虫收集于10ml离心管中。
2、松材线虫与拟松材线虫在树体内杂交取浙江松材线虫与中国拟松材线虫各200ul（约10-20万条），先后滴加到黑松枝条的伤口中，室温条件下杂交7d，后用贝尔曼漏斗法漏出线虫，在显微镜下挑出雌性成虫，将雌成虫单独培养10d，分离单条已受孕雌性线虫的后代。
4. 研究创新点
松材线虫与拟松材线虫在实验室条件下的杂交已经有很多人进行研究，然而松材线虫与拟松材线虫在树体内是否能够杂交还没有人进行过研究，本课题的特色与创新在于研究松材线虫与拟松材线虫在树体内的杂交，从而为研究病害的流行规律和病害的检疫等提供基础。
