黑荆树愈伤组织诱导条件及优化开题报告

 2021-08-08 23:41:31

1. 研究目的与意义

黑荆树(acacia mearnsii)为金合欢属树种,原产澳大利亚、新西兰、非洲、印度、斯里兰卡、美洲中部和印度尼西亚,具有生长快、适应性强、主伐期短、功能多的特点。

其树皮可提取原花色素,对人早幼粒白血病细胞hl-60有中效,分别对人低分化胃腺癌细胞bgc-823和人肝癌细胞bel-7402有弱效。其树皮单宁含量44%-49%,纯度可达82%,是生产栲胶的优质原料。黑荆树也能在低纬度地区,它是很有发展前途的造林树种之一,在提供工业原料、改善生态环境和提高营林经济效益方面都有着重要的作用。从经济效益方面考虑栽培以生产栲胶原料(树皮)和木炭、活性炭原料(树杆)为经营目标的黑荆树短周期工业原料林项目经济效益可观, 具有可行性。

过去十多年里,国内外学者对金合欢属树种离体快速繁殖技术曾开展许多研究,据报道应用组织培养获得成功的有寇阿相思(acacia koa)、金合欢属13种、马占相思(acacia mangium)、大叶相思(acacia auriculaeformisa. cunn. ex benth.)及其种间杂种、窄叶合欢和黑木荆。上述树种已能够通过器官培养获得再生植株。而目前黑荆树繁殖以种子繁殖为主,离体培养的研究很少,主要以茎尖为外植体进行培养。然而茎尖生长点培养虽然分化率高、生长快,但适宜取材的部位少,均难以达到规模化离体繁殖的要求;而叶片培养外植体来源广,但诱导率和分化率低、生长速度慢。因此探索一种行之有效的无性繁殖方法,对保持某些经选个体的优良性状、建立和推广无性品系、加速优良种植材料的繁育都具有现实的意义。

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2. 国内外研究现状分析

1 金合欢属树种组织培养的研究进展

1.1外植体的选择

迄今为止,金合欢属中大部分树种都以子叶节(muhammad et al.,2012;douglas et al.,2000;duhoux et al.,1985;dawan et al.,1992;vengadesan et al.,2002)、节(bhaskar et al.,1996)、茎尖(张华通等,1996)、带腋芽茎段(周丽等,1996)等为外植体通过器官直接发生途径获得再生植株,其中以茎段和茎尖为主。此途径获得的再生植株遗传变异小,能保持亲本的特性。马占相思幼嫩的外植体容易诱导不定芽(galiana et al.,1991)。

诱导愈伤组织常选用的外植体有子叶、胚轴、幼胚、叶片、茎段等,其中子叶、下胚轴和幼胚为理想的外植体。马占相思(xie et al.,2001)、儿茶(a.catechu)(das et al.,1996)、藤金合欢(a.sinuate)子叶(vengadesan et al.,2003)、黑木相思(a.melanoxylon)下胚轴(姬明,2006)、厚荚相思叶片(苏齐珍,2009)已成功诱导愈伤组织且分化不定芽形成植株;大叶相思子叶和下胚轴诱导的愈伤组织难以分化(mittal et al.,1989);hustache等(1986)曾试图用刺叶金合欢(a.senegal)的形成层和韧皮部诱导愈伤组织使其分化,结果不是很理想;珍珠相思(a.podalyrriifolia)最佳诱导愈伤组织的外植体是下胚轴,其次是幼胚、叶片、茎段(赵苹静,2009)。

幼嫩和未成熟的外植体最适合诱导体胚发生。该属成功诱导体胚发生的树种,除了阿拉伯金合欢(a.arabica)和藤金合欢用幼叶作为外植体,其他的像刺球花(a.farnesiana)、儿茶、大叶相思、阿拉伯胶金合欢(a.nilotica)、马占相思、金合欢(a.dealbata)等都是以未成熟胚乳、胚乳或下胚轴为外植体(谢响明等,2006)。

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3. 研究的基本内容与计划

1 研究内容

1.1 无菌体系的建立

以黑荆树的叶片为外植体,在超净工作台下,用清水、无菌水冲洗。用75%的酒精消毒3分钟,再用无菌水冲洗多次及消毒,经消毒后,将外植体放到辅有无菌滤纸的培养皿中,吸干材料表面的水分,用解剖刀切掉两端与消毒液接触的部分,再切成1cm1cm方块大小的叶片,待用。

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4. 研究创新点

总的来说,黑荆树植物组织培养的研究很少而且进度缓慢,至今还没有一个高效的完整的再生体系,严重影响着黑荆树的开发和利用。本实验采用黑荆树的叶片为外植体,试图探索一种易操作、可以大面积繁殖的黑荆树组培快繁体系。希望能找准促使黑荆树愈伤组织诱导和分化的激素种类和适宜的浓度,建立一个完整的无性繁殖再生体系,填补黑荆树组织培养上的空白,也为加快黑荆树无性繁殖研究步伐做出贡献,进而达到大量繁殖的目的。

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