1. 研究目的与意义
山樱花(cerasus serrulata (lindl.) g. don ex london),又称野生福岛樱、福岛樱、青肤樱、福建山樱花、草樱、樱花,为蔷薇科樱属植物,国内分布于黑龙江、河北、山东、河南、安徽、江苏、浙江、江西、湖南、贵州、福建,栖息在海拔500―1500米处。为我国重要的观赏木本植物,在城市公共绿地、庭院绿化中广泛应用,山樱花花开满种,花繁艳丽,极为壮观,是重要的园林观赏树种。山樱花也可作小路行道树。树皮和新鲜嫩叶可药用。
dna 作为生命体特有的遗传物质载体,携带生命个体生长和发育等必需的所有遗传信息,以纯化的 dna 分子形式或者基因组文库的方式进行保存就意味着对种质资源的保存,是传统资源保存方式的重要补充。从生物体中提取dna已成为分子生物学实验室中的一项常规技术。因此,dna 提取纯化技术作为一项基础研究工作,具有理论和实践双重意义。
本研究以山樱花的不同生长部位为试验材料,在提取方法、提取部位以及叶片阴干处理等方面进行了比较研究。以得出山樱花dna提取的最佳方法。为种质资源研究,杂交育种及良种选育提供了一定科学根据。.
2. 国内外研究现状分析
单志等结合传统sds法提取dna和silica吸附柱纯化dna的优点建立了能进行多种植物基因组dna提取的改良sds法。为提取植物基因组dna通用方法的建立提供了参考。
徐宝利等人以核果类果树油桃、扁桃、杏、山桃、榆叶梅和樱桃的幼叶为试材,进行了基因组dna的提取方法的比较研究,其中改良sds法效果最好;采用改良sds法提取油桃的幼叶、花蕾和韧皮部基因组dna的效果表明,三者均可以作为基因组dna提取的材料,且以幼叶效果最理想;采用改良的sds法可在自然阴干的扁桃和油桃叶片中提取到完整的dna;将改良sds法提取的油桃不同部位和自然阴干的扁桃和油桃叶片基因组dna,经ssr-pcr检测发现,扩增效果清晰稳定,完全可以应用于果树分子生物学研究。
李毅等改良常用的植物dna提取的ctab,sds法,以有效去除天麻多糖类杂质。用ctab法提取天麻鲜品不同部位(块茎、花序轴和胚芽)dna;用生理盐水浸泡天麻干品之后,在应用ctab,sds法提取天麻干品的dna。结果得出,应用改良的ctab,sds法提取天麻干品dna可用于pcr扩增,但dna测序未成功。
3. 研究的基本内容与计划
实验方案:参考扁豆DNA提取方法研究,制定实验计划。
(1) 查阅文献资料,制定计划
(2) 根据相关提取方法,配置适当的提取液
(3) DNA提取及纯化,DNA的检测
(4)分析数据,选取最适宜的方法
拟解决的关键问题:
针对山樱花不同生长部位的DNA提取、纯化及检验,探究山樱花DNA提取的合理方法。
研究计划:
山樱花嫩叶、幼果分离干燥 |
配置培养液 |
DNA提取与纯化 |
DNA检测 选取适宜的培养基 |
可行性分析
本研究方案是在项目组现有的研究条件和前期的研究基础上制定的。通过查阅大量的文献资料,我们发现近几年在植物DNA提取测定方面已经取得了很大的成果,且实验方法比较成熟。以南京林业大学校园内及福建等地山樱花为材料,进行遗传多样性和近缘物种的杂交实验为基础,本研究在前期研究的基础上进一步探讨更多山樱花DNA提取的适宜方法。
南京林业大学树木组实验室和院显微镜室具备本项目研究所需的主要仪器设备项目,组成员熟悉和掌握本项目研究的技术和方法。项目的研究方案切实可行。
4. 研究创新点
1、目前DNA提取方法试验已经广泛应用于核果类植物、扁豆、棉花、天麻等。但对于樱属植物的DNA提取方法试验方面还是空缺状态。
2、山樱花且具有很好的观赏、经济价值,以此为材料探索山樱花DNA提取方法,结合基因标记、增广技术有较好的实用价值和极为重要的现实意义。
