1. 研究目的与意义
簸箕柳(salix suchowensis)是当年即可开花的小灌木,种植资源丰富,较其它木本植物世代周期短,且其基因组测序已经完成,且存在丰富的自然变异,是进行木本植物遗传学研究的理想材料。
植物组织培养技术己广泛应用于各个领域,它为许多学科研究植物生长发育、抗性生理、激素调控机理及器官发生等提供了许多良好试材和有效途径。
但成熟的簸箕柳组织培养体系尚未建立,本课题拟利用簸箕柳叶片和茎段作为外植体,通过观察不同培养基成分对簸箕柳外植体脱分化和再分化能力的影响,探索簸箕柳组织培养技术体系,为后续的簸箕柳的遗传转化研究提供技术基础。
2. 国内外研究现状分析
柳树的组织培养的难易与基因型与培养基的类型有密切的关系。李洁(2003)对雪柳的组织培养进行了初步研究,她认为雪柳培养的基本培养基以BS为好,GS、MS 次之,激素组合以6-BA0.5 mgL-1 NAA0.01mgL-1 诱导腋芽效果明显。 关亚丽等(2009)以簸箕柳的茎段为初始外植体,结果显示:6-BA1.0 mgL-1 NAA0.01 mgL-1 诱导腋芽效果较好。 Stoehr 等(1989)用 S.exigua 无性系的叶片作为外植体进行繁殖,在含0.1 或0.5 mgL-1 BA 和2,4-D 的3 种培养基上可以诱导出愈伤组织,0.1 或0.5 mgL-1 BA 上继代培养可以诱导出芽原基,茎在无激素的1/2 MS培养基上生长超过10 cm 长后,即可生根。Agrawal.等(1994) 用杂种柳(S.fragilis S.lispoclados)的子房进行微体快速繁殖,认为离体茎在不含激素的SH培养基中培养时具有最高的生根率,杂种小植株在田间生长良好。Lyyra等(2006)对黑柳的组织培养进行研究,结果以0.5 mgL-1 BA诱导休眠芽效果较明显。
3. 研究的基本内容与计划
1研究内容: 1) 将收集的多种簸箕柳进行扦插培养; 2) 采集外植体诱导愈伤组织; 3) 探索不同成分培养基对愈伤组织的诱导情况; 4) 探索不同成分培养基对外植体丛生芽及根系的诱导情况。
2课题计划:2013.12-2014.2实验准备:认真查阅木本植物,尤其是杨柳科植物组织培养相关的研究文献,总结出国内外学者在这方面的研究手段和方法,写出文献综述和开题报告;2014.2-2014.4正式实验:掌握无菌操作的步骤及其注意事项,及时进行外植体采集,仔细观察、记录簸箕柳外植体在不同培养基上的生长情况及生长状态。
2014.4-2014.5结果分析:利用excel软件对所得数据进行统计分析,并根据实验结果讨论不同培养基成分对簸箕柳愈伤组织的诱导情况,按要求撰写毕业论文。
4. 研究创新点
虽然植物组织培养技术己广泛应用用于各个领域,但成熟的簸箕柳组织培养体系尚未建立,本课题拟利用簸箕柳叶片和茎段做为外植体,通过观察不同培养基成分对簸箕柳外植体脱分化和再分化能力的影响,探索簸箕柳组织培养技术体系,为后续的簸箕柳的遗传转化研究提供技术基础。
