脯氨酸对杉木胚性愈伤超低温冷冻保存的影响开题报告

1. 研究目的与意义

杉木是我国特有的速生商品材树种，它生长快，材质轻韧，纹理通直，抗虫耐腐，加工容易；被广泛应用于用材、建筑、药用等方面。

目前利用杉木未成熟合子胚已经能成功诱导胚性胚柄团并最终实现体胚发生，但是经过长时间的继代培养以后，胚性材料体胚发生的能力会逐渐降低直至丧失。

将超低温冷冻保存技术和杉木胚性愈伤组织培养技术结合起来，能长期保存植物材料并保证其遗传稳定性，可有效解决杉木胚性材料体胚发生能力衰退的问题，具有重要的研究和应用价值。

2. 国内外研究现状分析

低温引起蛋白质的变化似乎是一个普遍的规律，脯氨酸在超低温冷冻过程中可以提高植物细胞的抗逆性，有利于保持愈伤组织超低温冷冻保存后的活性。

体细胞胚发生繁殖效率高，不受自然条件限制。

　　超低温保存是目前唯一不需继代的长期保存植物种质资源的方法。

3. 研究的基本内容与计划

研究内容：　 本实验分为两种方向进行研究，一是在预培养阶段添加不同浓度的脯氨酸，解冻、恢复培养阶段不添加脯氨酸；二是在预培养阶段不添加脯氨酸，在解冻、恢复培养阶段添加不同浓度的脯氨酸。

来验证脯氨酸在哪个阶段对杉木胚性愈伤组织超低温冷冻保存有影响。

　　本实验流程预培养（5天）→预处理、冷冻（2天）→解冻（2天）→转培（2天）→复苏培养（25天左右）。

4. 研究创新点

在多个研究报道中发现脯氨酸能有效提高植物材料的超低温冷冻保存效率。

本实验在已研究的杉木胚性材料的超低温冷冻保存技术的基础上，探讨脯氨酸在其过程中的作用。

本实验计划分不同浓度在不同阶段向培养基中添加脯氨酸，以探求最适宜的脯氨酸浓度和最佳的添加阶段，使得冷冻后存活率更高，并验证脯氨酸的抗寒性。