松材线虫体内细菌的种群稳定性分析及与线虫致病力的关系开题报告

 2021-08-09 00:15:14

1. 研究目的与意义

松材线虫病是松树的一种毁灭性病害,被认为是松树的癌症。

自然条件下该病可危害40种松属植物和9种非松属植物。

该病的发生涉及寄主、线虫、天牛、真菌、细菌以及环境地理等多个方面。

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2. 国内外研究现状分析

袁为敏等(2011)通过通过透射电子显微镜观察,结果在线虫的肠道内观察到细菌,从而证明,线虫的体内也存在细菌。Wu,等(2013),对松材线虫体内细菌的种类及功能多样性进行了研究,发现体内细菌的种类与线虫的致病力存在一定联系。Claudia S.L等(2011)通过比较实验室长期保存的线虫携带的细菌与从患病寄主上新收集的线虫携带的细菌的种类和优势菌群,发现在实验室长期保存的松材线虫体表仍然携带有一些优势细菌菌群,推断这些优势细菌与线虫之间一定存在特定的关系,这种关系可能在松材线虫病发展中起重要作用。Proenca(2010)认为与松材线虫有关的细菌种类因森林地域不同而不同,而且没有一株细菌是在所有地区都有的,对于同一区域的样本而言,60-100%的菌株能够产生铁传递蛋白,至少40%的菌株能够产生脂酶。然而,对松材线虫体内细菌的群落稳定性的研究还很少。

3. 研究的基本内容与计划

1、 松材线虫不同龄期虫体(卵、幼虫、成虫)体内细菌的分离与鉴定

采用2011年分离自天目湖马尾松的松材线虫p.m11-01虫株。大量分离松材线虫的卵、幼虫以及成虫,通过体表灭菌清除线虫体表的伴生细菌,对线虫虫体进行研磨,在na平板上进行图布,进而获得不同龄期的松材线虫体内细菌,并对体内细菌种类进行鉴定,从而分析不同龄期虫体内细菌的稳定性。

2013.02-2013.03

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4. 研究创新点

松材线虫和伴生微生物,尤其是伴生细菌之间形成一个微生态系统,它们之间存在一定的共生关系和协同进化。

以往对松材线虫与细菌的关系的研究多集中在体表细菌,松材线虫体表环境复杂,各虫株间携带细菌种类和数量差异较大,缺少稳定性。

pcr-dgge 技术的应用使得对微生物的研究跨越了非培养技术的障碍,本实验结合对体内细菌的分离鉴定以及pcr-dgge技术对松材线虫在不同生活史阶段中、不同培养条件以及不同培养时间体内细菌的稳定性进行分析,在同类研究中还属首次。

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