1. 研究目的与意义
银杏又名公孙树、白果树等,为银杏科银杏属落叶高大乔木,是当今地球上最古老的树种之一。
采用tris-hcl法提取银杏种仁蛋白,考马斯亮蓝法进行蛋白含量测定。
以液料比、提取液浓度、提取液ph及提取时间进行单因素及正交实验,以确定最佳提取工艺参数。
2. 国内外研究现状分析
国内外同类研究概况(综述)
1 银杏简介
银杏(ginkgo biloba l.)为银杏科(ginkgo aceae)银杏属(ginkgo)多年生落叶乔木,现仅存一科一属一种,有裸子植物活化石之称,是我国特有的珍贵孑遗植物[1]。近年来,银杏资源的开发倍受人们关注,我国各地有计划地扩大银杏树的种植。由于银杏制剂对防治心脑血管疾病、老年痴呆症和对抗血小板活化因子的作用的发现,国内外加大了对银杏化学成分、药理活性及临床应用等方面研究的力度,相继研制开发了银杏植物药制剂、功能性食品和保健品化妆品,一段时期内形成了集栽培、研究和应用为一体的银杏综合开发热潮。但就中国银杏资源产业发展现状而言,银杏种子仍是银杏的主要经济器官,作为一种珍贵的坚果,用作滋补品和食品,在中国已有悠久的历史。随着银杏种植业规模的不断扩大,银杏种仁(俗称白果)的产量也日益增加,年产量超过14000 t,销售逐渐出现困难,价格也日益下降,严重影响了银杏产业的发展。因此,研究和生产具有高新技术含量的银杏种仁深加工产品迫在眉睫。
3. 研究的基本内容与计划
1.研究内容 1 Tris-HCl提取法单因素试验 1.1 提取液浓度对银杏蛋白提取量的影响 取10g已脱脂的白果粉,分别加入不同浓度的Tris-HCl缓冲液(pH8.5)200mL进行提取,放于4℃冰箱中浸提6h,在4℃、10000r/min的条件下离心10min,取上清液测定白果蛋白质的含量。并对提取所得蛋白进行硫酸铵分级沉淀、离心,透析得到粗蛋白。 1.2 提取液pH值对银杏蛋白提取量的影响 取10g已脱脂的白果粉,分别加入200mL不同pH值,浓度为0.15mol/L的Tris-HCl缓冲液进行提取,放于4℃冰箱中浸提12h,在4℃、10000r/min的条件下离心10min,取上清液测定白果蛋白质的含量。并对提取所得蛋白进行硫酸铵分级沉淀、离心,透析得到粗蛋白。 1.3 料液比对银杏蛋白提取量的影响 取10g已脱脂的白果粉,分别加入不同体积,浓度为0.15mol/L的Tris-HCl(pH8.5)200mL进行提取,放于4℃冰箱中浸提12h,在4℃、10000r/min的条件下离心10min,取上清液测定白果蛋白质的含量。并对提取所得蛋白进行硫酸铵分级沉淀、离心,透析得到粗蛋白。 1.4 提取时间对银杏蛋白提取量的影响 取10g已脱脂的白果粉,分别加入200ml浓度为0.05mol/L的Tris-HCl(pH8.5)200mL进行提取,放于4℃冰箱中分别浸提不同时间,在4℃、10000r/min的条件下离心10min,取上清液测定白果蛋白质的含量。并对提取所得蛋白进行硫酸铵分级沉淀、离心,透析得到粗蛋白。 2 Tris-HCl提取法正交试验 在提取液浓度、提取液pH值、料液比、提取时间对银杏蛋白提取量的影响的单因素试验基础上,以提取液浓度、提取液pH值、料液比、提取时间为4个因素,分别筛选三个水平采用正交实验表,进行正交优化试验,以银杏蛋白的提取量为评价指标,分析Tris-HCl法提取银杏蛋白的最佳工艺参数组合。 3 银杏种仁蛋白对供试菌生长发育的影响 在抑菌性研究的基础上,研究银杏种仁蛋白对供试菌种生长曲线的影响,并通过扫描电镜、透射电镜研究银杏种仁蛋白对供试菌种结构的影响,从而分析银杏种仁蛋白对供试菌种生长发育的影响。 2.研究计划 第一阶段 12周(12.10-12.24):查阅资料,确定测定方法 第二阶段 26周(12.24-1.22):Tris-HCl提取法单因素试验 第三阶段 611周(2.25-4.1):Tris-HCl提取法的正交试验 第四阶段 1216周(4.1-5.1):银杏种仁蛋白对供试菌生长发育的影响 第五阶段 1618周(5.1-5.13):结果分析、毕业论文撰写、答辩 |
4. 研究创新点
通过Tris-HCl法对银杏种仁中的蛋白进行提取,并进行该提取方法的单因素试验和正交试验,选取最佳工艺参数组合,得出提取银杏蛋白的最适方法。
为银杏的深加工提供一定的理论指导,提高银杏产业的经济效益。
