1. 研究目的与意义
随着松材线虫病的危害逐步扩大，需更加深入的研究其致病机理和防治措施，因此，病原物松材线虫的采集与保存作为研究的基础也越来越受到重视。本试验将在前人研究的基础上，对松材线虫冷冻保存技术进行进一步研究，以期筛选出适合于松材线虫长期保存冷冻保存技术，进一步提高冷冻保存存活率、延长保存时间，为大量保存各种遗传背景的线虫株系提供便利，同时为替代实验室连续接种培养的传统方法提供参考依据，还可以为其他生物材料的冷冻保存提供参考。
2. 国内外研究现状分析
目前，国内有关松材线虫致病机理、防治途径以及传播方式等方面的研究很多，但是在种质资源的长期保存方面还未见报道，国外也仅有零星报道，但由于处理方法与实验条件各不相同，不同文献资料上的结果存在很大差异，即使是相同的处理方法，也得到不同的结论，所以，对松材线虫的冷冻保存需要更为系统的研究。
3. 研究的基本内容与计划
1、松材线虫玻璃化保护剂的筛选（2012.2.16~2012.2.26）
2、冷冻保护剂不同浓度对松材线虫冷冻效果的影响（2012.2.27~2012.3.6）
3、比较非渗透性保护剂对松材线虫冷冻效果的影响（2012.3.7~2012.3.17）
4. 研究创新点
玻璃化保存(Vitrification)是一种超速冷冻方法。它是以极快的速度冷冻细胞，使细胞内外的游离水迅速形成玻璃样物质，而不形成冰晶。这种保存方法既避免了由于慢速降温时导致的盐浓度升高，又防止了由于冰晶形成造成的物理损伤，可获得较高存活率。玻璃化试剂的研究主要从以下几个方面：(l)寻求一些能形成玻璃化而又没有太大毒性的溶质，减少高浓度溶液对细胞的毒害，可通过两步平衡细胞；缩短平衡时间；降低平衡温度；使用蔗糖，海藻糖这类抗毒性的物质来解决。(2)采用大分子冷冻保护剂诱导玻璃化；(3)通过联合应用几种冷冻保护剂来提高解冻后存活率。可以预期，通过在方法上的不断改进和提高，将来还可能推广到其他生物材料的长久保存，为生物学以至人类医学发展服务。
