1. 研究目的与意义
松材线虫病是松树上的一种毁灭性病害，目前该病的致病机理仍不明。果胶裂解酶是果胶酶的重要组成部分，能催化聚半乳糖醛酸α-(1，4)键的断裂，是一种能降解植物细胞壁、导致植物组织软化甚至死亡的解聚酶。本重点实验室前期研究已构建松材线虫强毒和弱毒虫株抑制消减杂交cDNA文库，筛选出差异表达的果胶裂解酶基因。本研究以松材线虫为载体，通过组织原位杂交技术来分析松材线虫果胶裂解酶基因在细胞和组织中的分布，进而对该基因进行组织定位，并推测其基本作用和功能。研究结果有助于进一步弄清松材线虫病的致病机理。
2. 国内外研究现状分析
1.huang等从南方根结线虫上分离了2个第3家族的果胶裂解酶基因mi-pel-1和mi-pel-2,原位杂交试验证明这两个基因均是在线虫食道腺表达,该研究说明南方根结线虫可能在侵染寄主的早期阶段将果胶裂解酶分泌至植物组织中,以便线虫在植物细胞间的移动。
2.dautova等和jaubert等分别从南方根结线虫中分离到β-1,4内切木聚糖酶基因mi-xyl-1和多聚半乳糖醛酸酶基因mi-pg-1,它们的表达产物均有软化植物细胞壁以协助根结线虫侵入寄主及在寄主内移动的作用。
3.martinharterink等使用了一种新型的荧光原位杂交技术单分子mrna荧光原位杂交技术(singlemoleculemrnafish)对调节秀丽小杆线虫体内神经母细胞在神经中枢上前后迁移的基因进行了研究，实验结果表明，秀丽小杆线虫神经卵母细胞在神经中枢上的定位是被wnt和wnt抑制物的相互作用所调节，这种作用可能与初生体的神经中枢系统的进化与保留相关。
3. 研究的基本内容与计划
1.松材线虫的扩大培养（2012.2-2012.3）
2.松材线虫总RNA的提取和cDNA的合成（2012.3-2012.4）
3.地高辛探针的制备与松材线虫果胶裂解酶基因的组织定位(2012.4-2012.5)
4. 研究创新点
1.国内有关果胶裂解酶基因的研究多限于植物和菌物，对松材线虫果胶裂解酶基因的研究还未见报道。
2.通过定位松材线虫果胶裂解酶基因，推测其基本功能，为探寻松材线虫的致病机理奠定基础。
