1. 研究目的与意义
研究显示，青钱柳叶含有丰富的三萜类化合物。三萜类化合物具有广泛的生理活性，通过对生物活性及毒性的研究结果表明，其具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、溶血、降低胆固醇、抗生育、杀软体动物等活性。一些游离的三萜单体已作为药物应用于临床。例如，甘草次酸具有促肾上腺皮质激素(ACTH)样活性，临床用为抗炎药，并应用于胃溃疡病的治疗；齐墩果酸具有降低转氨酶的功能，临床用于治疗急性黄疸肝炎；川楝素临床被用于去蛔虫药。
本课题利用Sephadex LH-20层析柱，用甲醇和水反相洗脱为青钱柳叶三萜的提取及分离纯化提供理论依据和技术参数，为其深入研究奠定基础。参数包括流动相甲醇和水的比例，流速，而传统的提取方法得率普遍较低，这就为工厂大规模制备三萜提供得率相对较高的加工方法。2. 国内外研究现状分析
关于青钱柳叶中三萜的分离：目前，关于青钱柳三萜类化合物的研究报道较少，只有江西中医学院和中国医学科学院两家单位对青钱柳三萜类成分进行了研究。钟瑞建等从青钱柳叶中分出了4个五环三萜成分，分别为：2a-羟基熊果酸，青钱柳酸B(Cyclocaric acid B)、Ar-junolic acid和青钱柳酸A(Cyclocaric acid A)。2005年，舒任庚等从青钱柳的低极性部位分离得到齐墩果酸、乌苏酸和Epikatonic Acid 3个三萜类成分。此外，江志勇等从青钱柳叶中分得两种青钱柳甙B(Cyclocarioside B)和青钱柳甙C(Cyclocarioside C)。
关于Sephadex：张慧丽等采用Sephadex LH-20层析柱料分离人参皂苷Re收率为58.6%，得到的人参皂苷Re的纯度为96.2%。曾家豫等用SephadexG-75对纤维素酶进行分离纯化，获得了一个CMC酶组份，其比活力提高到原来的4.9倍，回收率为41.6%。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容：1、取青钱柳叶干燥粉末，用甲醇超声浸提，将醇提液旋转蒸发浓缩，得到三萜粗提液浸膏，加水，用石油醚和氯仿分别萃取，将氯仿相旋转蒸发浓缩得三萜粗浸膏；
2、冷冻干燥得到三萜粗浸膏粉末；
3、三萜粗浸膏粉末中三萜浓度的测定，并做标准曲线；
4. 研究创新点
凝胶色谱法是利用分子筛的原理来分离分子量不同的化合物，在用不同浓度的甲醇、乙醇或水等溶剂洗脱时，各成分按分子量递减顺序依次被洗脱下来，即分子量大的三萜及其苷类化合物先被洗脱下来，分子量小的则后被洗脱下来。凝胶过滤法所用的介质为凝胶珠，其内部为多孔网状结构。
本实验中用的是交联葡聚糖凝胶，商品名为sephadex，sephadex lh-20是sephadex g-25的羟丙基衍生物，能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。
总苷中常因含有亲水性色素等杂质，在用薄层色谱法寻找分离条件时在薄层板上得不到分离度较好的斑点，而是一条线。此外，在用硅胶等色谱法已分离得到的较纯的三萜苷中也往往掺杂一些其他杂质，这时采用sephadex lh-20，以甲醇等为洗脱剂进行纯化可得到令人满意的结果。
