1. 研究目的与意义
本课题是以春兰正常花和蝶花为材料，以花芽RNA为模版，进行反转录，以反转录产物为模板进行PCR扩增，获得部分片段，测序后通过Blast同源比对分析表明，获得基因的部分序列，设计引物进行cDNA末端扩增获得全长序列，并比较正常花和蝶花cDNA序列的异同。通过这些实验克隆出CgDEF4基因，为CgDEF4基因的表达分析以及揭示DEF4在春兰蝶花形成过程中作用机理做前期准备。这对了解春兰花型发育，定向选育奇特的花型具有重要意义。
2. 国内外研究现状分析
兰科植物是开花植物中最大的家族之一，其花高度进化，具有花瓣状的萼片，特化的唇瓣和雌雄蕊合生的蕊柱，是单子叶植物花发育生物学研究的理想材料。近年来，有关兰花MADS-box基因的研究已经取得一些进展，相继从石斛（Dendrobium，A类和E类），球花石斛（Dendrobiumthyrsiflorum，A类，C类和D类），姬蝴蝶兰（Phalaenopsisequestris，B类），蝴蝶兰（Phalaenopsissp，C类和D类），文心兰（Oncidium，B类），木石斛（Dendrobiumcrumenatum，B类、C类、D类和E类）等兰科植物克隆了与花发育有关的A、B、C、D和E类基因。近年来更多的兰花A类基因，B类基因和C/D类基因被鉴定和研究，而春兰的B类基因研究相对较少。
3. 研究的基本内容与计划
内容：1.从春兰正常花和蝶花花芽中提取rna；2.以花芽rna为模版进行反转录；3.以反转录cdna为模板进行pcr扩增，获得部分片段，送去测序；4.通过blast同源比对分析，获得了基因的部分序列；5.根据所得序列设计3-race和5-race的特异引物，进行cdna末端扩增，测序后将两端拼接在一起，得到全长cdna序列；6.比较春兰正常花和蝶花cdna序列的异同。
计划：2016年1月1日～1月16日，阅读文献，撰写开题报告
2016年1月17日～4月28日，进行实验；
4. 研究创新点
春兰为我国特有植物，是高度进化的兰科植物，具有高度特化的唇瓣和雌雄蕊合生的合蕊柱，是研究花发育的理想材料。本课题通过提取RNA、反转录、RACE扩增等实验为基因的表达和功能研究做前期准备，对于理解兰科植物蝶花的形成以及培育具有重要意义。
