1. 研究目的与意义
四照花类植物较高的药用和绿化价值决定了其较广阔的开发前景。针对四照花类植物种子发芽时间长、发芽率低等问题,生产中应尽量采用无性繁殖。根据文章所述现状,四照花类植物的繁殖技术将在以下方面加强研究,解决四照花类植物优良品种的引种与杂交驯化;加强四照花类植物组培生理机制的研究,以便更精确地掌握外源激素的种类、数量和配比,尽早建立稳定、高效的快繁体系;加强四照花类植物组织培养的研究,以解决其种源不足、发展速度缓慢的问题;加强体细胞胚悬浮培养研究,以解决分化率低、繁殖速度慢等问题。
2. 国内外研究现状分析
关于四照花的组织培养的相关研究很多。李卉(2007)对峨眉四照花进行了离体快繁研究,为扩大种源,产业化生产峨眉四照花提供了理论基础和技术支持。也为开展四照花类其他植物的组织培养提供了经验。研究的主要结果如下:野外采集的外植体,以饱和漂白精溶液 吐温-80法处理10min,污染率较低,且植株褐化现象较轻。对于已污染的材料,进行了青霉素灭菌试验,400万单位/L的青霉素无菌水溶液处理峨眉四照花组培细菌污染苗40min效果最好。在培养基中添加抗氧化剂、抑制剂、吸附剂能有效的抑制峨眉四照花褐变的发生,本试验中以添加活性炭(AC)4g/L效果最好。峨眉四照花采取当年生半木质化嫩茎或茎尖为材料较好,有利于启动。峨眉四照花不同部位外植体,愈伤组织的诱导率也不同。路承香和李仲芳等(2008)采取峨眉山4~5年生四照花树体枝条的幼嫩茎尖作为外植体,研究不同生长激素对外植体诱导发育出丛生芽的影响。结果表明:培养基MS 6-BA2.0mg/L IBA0.5mg/L和MS 6-BA2.0mg/L IBA1.0mg/L组合对不定芽诱导效果较好。培养基MS NAA0.5mg/L 6-BA2.0mg/L组合诱导茎尖产生大量愈伤组织。该研究为峨眉四照花的快速繁育、种质资源保存提供了技术依据和参考。Trigiano等(1989)最早以大花四照花合子胚为外植体诱导体细胞胚胎发生和植株再生。Declerck等(1994)最早以大花四照花的腋芽为外植体仅诱导丛生芽,没有尝试诱导根。Kaveriappa等(1997)首次以大花四照花的节点和幼苗的分生组织为外植体建立了完整的植株再生体系。SaschaL.Beck等(1998)对黑荆进行离体培养,为以后的组织培养之类的提供了技术支持和宝贵的经验。还有,SandalI等(2005)研究了生长素含量对山茶花外植体生长的影响,该研究为探索植物激素在组织培养过程起的作业提供了很多的参考可有用的数据。
3. 研究的基本内容与计划
a、研究内容
一、培养材料的采集
在本次实验中,采用的培养材料狭叶四照花的茎尖或者为带芽茎段。
4. 研究创新点
本实验在前人研究的基础上,对一系列的实验方法进行整合和补充,同时结合了控制激素对组织培养影响方面的实验。在研究四照花组织培养的同时能够同步地了解不同激素浓度对组织培养的影响,并对不同激素加以比较,能更好的探讨组织培养的要点以及如何更好的促进组培苗的成活,同时还能通过对四照花幼苗的培养的探究,进一步认识四照花的各方面特性,为今后林业生产上进行四照花类植物的组织培养提供一定的理论基础。
