1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
1.本课题的意义分枝是植物生长中普遍存在的现象,在植物形态建成中占有十分重要的地位。
菊花(chrysanthemum morifolium)原产我国,是我国十大传统名花和世界四大切花之一,具有很高的经济与观赏价值。
分枝是切花菊最重要的园艺性状之一,决定其栽培方式、生产成本与观赏品质,开展菊花分枝性状的分子调控机理的研究无疑将为培育具有理想分枝性状的切花菊新品种提供理论指导。
2. 研究的基本内容和问题
.研究的目标(1)获得psrdx-cmwrky51的转基因菊花株系(2)明确cmwrky51基因的基本功能2.研究的内容本研究以已获得的菊花cmwrky51超表达拟南芥分枝表型为依据,利用切花菊神马为材料,拟开展cmwrky51基本功能鉴定,为菊花分枝性状的分子设计育种提供理论基础和优异基因储备。
选材合理、针对性强,有特色和代表性。
2.1cmwrky51基因对菊花的遗传转化:利用已构建的功能沉默载体psrdxcmwrky51,通过农杆菌介导的叶盘侵染法获得转基因菊花,检测转基因株系中cmwrky51的表达情况。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法 利用已构建的植物功能沉默载体psrdx-cmwrky51,通过转基因获得转基因菊花;通过统计分枝长度、分枝角度、分枝数和分枝高度等指标,明确cmwrky51基因对菊花分枝表型的影响。
2.技术路线(见附件)3.实验方案3.1转基因菊花的获得:利用已构建的功能沉默载体psrdx-cmwrky51,通过农杆菌介导的叶盘侵染法获得转基因菊花;获得阳性株系后,用sds法提取叶片dna,检测植物表达载体是否整合到植物基因组中,另提取叶片rna,反转录后,结合特异引物进行pcr,检测转基因株系中cmwrky51的表达情况。
3.2转基因株系分枝性状调查:侧芽数:主茎上侧芽的数量,计数;分枝数:主茎上分枝的数量,计数;分枝高度:分枝基部与地表面的距离,单位cm;分枝长度:分枝基部与分枝顶端的长度,单位cm;分枝角度:分枝与主茎之间的角度,单位为o4.可行性分析4.1拥有特色的研究材料: 所在课题组现为中国菊花种质资源保存中心,从六五开始共收集保存菊属及其近缘属野生资源 100 余份,菊花品种 3000 余个,选育出不同花期地被菊、切花菊和盆栽小菊品种 100 余个,为实验的进行提供了丰富的研究材料。
4. 研究创新点
创新之处(1)本研究选题针对性强、科学价值高分枝性状是直接影响切花菊观赏品质和经济效益的重要性状之一。
虽然菊花分枝性状的生理机理、遗传机制已经较为明确,但菊花分枝性状的分子机理研究尚很薄弱,严重制约了分枝性状的定向育种。
本项目拟以改变模式植物拟南芥分枝性状的菊花cmwrky51基因为研究对象,率先开展cmwrky51参与菊花分枝调控的分子机制研究,具有明显的创新性,有望丰富植物分枝调控的分子机理,并进一步加深对wrky转录因子生物学功能的认识。
5. 研究计划与进展
1.研究计划2015.06-2015.12菊花pSRDX-CmWRKY51转基因植株的获得2016.01-2016.04对转基因植株进行分枝表型鉴定,初步明确目的基因的功能2016.04-2016.06论文撰写及答辩2.预期进展(1)得到pSRDX-CmWRKY51转基因株系(2)明确CmWRKY51基因的基本功能
