1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.1研究意义：
菊花（chrysanthemummorifolium）又名鞠秋、女华、帝女花等，多年生菊科菊属（chrysanthemuml.）多年生宿根草本或亚灌木(林容等.1985)。菊花起源于我国，因其品种繁多，姿态万千，色彩丰富，有着很高的观赏价值，深受人民大众喜爱，是经过长期人工选择培育出的名贵观赏花卉，在我国有三千多年的栽培历史。菊花既是我国十大传统名花之一，也是我国四大切花之首。在我国传统文化、生产和园林应用中占有十分重要的地位，可做观赏、药用、食用等，具有很高的观赏和经济价值(teixeiradasilvaetal.2013)。菊花按花期分为夏菊、早菊、秋菊、寒菊、四季菊。其中秋菊属短日照植物。
花期是观赏植物不可缺少的一个重要品质，菊花作为典型的短日开花植物，其花期相对集中且多在秋季，难以实现菊花的周年生产。在传统的菊花育种过程中，众多菊花品种中却少有响应长日照开花的品种，加之其花期调控的机理尚不明确，这些都造成了花期育种的研究进展较缓慢，使得菊花的周年生产成为菊花产业中相对的困难之处。随着对植物花期研究的日益深入，开发和利用可在其他季节开花的菊花品种具有重大的应用和经济价值。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标：
（1）cmftl1基因的克隆
（2）cmftl1可变剪切植物表达载体的构建
3. 研究的方法与方案
3.1研究方法
菊花cmft-like1基因的克隆
选取苗期长势健壮的植株第三片完全展开叶（从顶端开始数），迅速液氮冷冻，采用rnaisoreagent(takaracode:d312)提取叶片总rna；oligo（dt）18primer为反转录引物，采用smartmmlvreversetranscriptase反转录体系（clontechcat.no639522）制备cdna模板。引物设计均使用primerpremier5.0软件。通过pcr，获得含有目的基因的中间片段，进行琼脂糖凝胶电泳后，切胶回收并纯化（axygenagarosegeldnapurificationkitver.2.0），然后连接、转化并测序。根据得到的中间片段序列设计引物，使用invitrogen公司race试剂盒进行目的基因的3race和5race，获得目的基因的5utr和3utr片段，将获得的pcr扩增片段测序结果与中间片段序列拼接。根据拼接后的全长序列再设计全长引物，使用phusion超高保真酶进行全长pcr扩增获得特异条带，进行琼脂糖凝胶电泳，切胶纯化后使用pmd19-tvector（takara）作为克隆载体。进行连接、转化大肠杆菌dh5α并测序。最终获得目的基因全长序列。
4. 研究创新点
花期是观赏植物不可缺少的一个重要品质，菊花作为典型的短日开花植物，其花期相对集中且多在秋季，难以实现菊花的周年生产。以切花菊品种神马为材料，研究菊花CmFT可变剪切的机制有助于科学地实现菊花的花期调控。而本实验为进一步研究4种可变剪切的CmFTL1在菊花开花调控中的应用奠定了基础。
5. 研究计划与进展
研究计划：
2015年01月～2014年02月查阅相关资料文献并学习相关实验技术
2014年02月～2014年03月菊花cmft可变剪切的克隆。
