不同品种葡萄采后贮藏生理变化及相关基因的表达分析开题报告

 2022-01-28 21:50:05

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

1.研究意义葡萄果实柔软、皮薄、多汁,不耐贮运。

在贮藏保鲜过程中,极易发生腐烂、落粒、失水、褐变等现象,这给鲜食葡萄的发展带来极大困难,鲜食葡萄供应期短,不耐贮藏是制约我国目前葡萄产业发展的主要因素,现有的方法、技术及设备条件已不能完全满足葡萄保鲜的需要。

果实采后品质变劣和生理衰老是影响果实贮藏保鲜的重要因素,通过分子手段探明果实采后生理变化规律研究开发对保持果实采后品质和延缓生理衰老至关重要。

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2. 研究的基本内容和问题

1.研究的目标葡萄是世界性的主要水果,也是我国栽培的主要落叶果树之一。

葡萄果实因色味俱佳并富含糖、维生素、蛋白质、有机酸和矿物质等营养物质而深受人们的青睐。

随着人们对物质生活水平的追求越来越高,对鲜食葡萄的质量要求也越来越高。

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3. 研究的方法与方案

1.研究方法根据品种不同选择对应成熟时期采摘果穗良好成熟度适中的葡萄果穗3穗,采后放置在恒温25℃的培养间中,一穗留做常温储藏观察生理表现,每间隔6天观察一次落粒以及腐烂状况并且称量果穗失水量,另两穗作为平行采样,测量果穗贮藏过程中落粒数量、单果重(用电子天平(0.01g)称量单粒质量重复3次以上取平均值)、浆果耐压力变化(参照欧阳寿如等的方法将完好果粒剪去果梗置于一块平板玻璃上再在果粒上面垫一块约10cm2的正方形玻璃用gy-1型硬度计将其探头对准果粒压下直至果实破裂记录表盘读数即为该果粒的耐压力重复3次以上取平均值)、果柄耐拉力(将果柄与弹簧秤相连沿果粒纵轴向拉至果柄从果实上脱离记录弹簧秤读数即为果柄耐拉力重复3次以上取平均值)、可溶性固形物含量、多聚半乳糖醛酸酶(pg)活性测定(称取葡萄果柄离区组织1g,置于研钵中,加入3倍的蒸馏水,冰浴匀浆。

按卢春彬等(1990)的方法制备酶液并测定pg活性,pg的活性以u mol半乳糖醛酸g-1fw h-1表示)、过氧化物酶(pod)活性测定(按kochba等(1977)的愈创木酚氧化法进行,pod活性以od470g-1fw min-1表示)。

1.3 rna 的提取纯化与cdna合成葡萄离区总rna的提取、消化参照chang等(a simple and efficient method for isolating rna from pine trees)和张彦苹等(适于葡萄不同组织 rna 提取方法的筛选)的方法。

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4. 研究创新点

1. 创新之处(1)在基因水平上对以往的结论进行证明。

(2)通过在基因水平上对影响品质变化基因进行进一步验证与分析,可以为深入分析葡萄采后衰老的的内部分子调控机制(3)通过本项目的研究,可以提高参与者探索生命本质的积极性,并提高实际动手操作能力,掌握一系列相关实验方法及技巧,为日后的研究学习打下良好基础。

5. 研究计划与进展

1. 研究计划及预期进展2014年6月制定试验计划,准备实验所需设备、材料2014年7月-9月下旬进行不同品种葡萄样品的采集,按照不同品种成熟快慢分批次进行采后贮藏观察,并且每次观察进行样品采集,采集后样品放入-40℃冰箱中保存。

2014年10月-11月将之前采集好的样品进行生理指标的测量,包括可溶性固形物的变化、pg活性的变化、pod活性的变化2014年12月-2015年1月,对所采集样品离区进行rna的提取,反转录并且进行荧光定量实验,分析aba、pg和pod基因表达量的变化2015年2月-2015年3月进行毕业论文的撰写1.1预期研究成果本实验预计历时9个月。

我们在这段时间内,将诚实诚信,并积极完成研究中的各项实验内容,争取通过团队成员的努力以及指导老师的帮助,达到一系列的实验目的,并完成相应论文报告的撰写,圆满完成实验研究。

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