1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
(一)本课题的意义花粉萌发与花粉管生长是植物生殖过程中的重要生理现象,它关系到植物能否正常完成受精过程。
花粉的萌发和花粉管的伸长生长是一个复杂的生理生化反应过程,受很多信号通路的调控[ ],[ ]。
通过已有研究发现,低浓度的植物生长调节剂如naa , iaa , 6-ba和2,4-d对荔枝、桃、苹果和梨等的花粉萌发和花粉管生长有促进作用,但使用浓度过高时却表现出抑制效应[ , , ]。
2. 研究的基本内容和问题
(一)研究目标1、研究不同浓度ala对翠冠花粉萌发、花粉管生长及其相关酶活性的影响,进行数据总结与科学的分析考查ala的生理功能。
2、通过研究ala对梨花粉的影响,进一步分析ala在生产上的作用,可以尝试将ala运用到其他农作物生产上,可以为其他农作物生产提供相关的建议。
(二)实验内容:1.不同浓度ala对梨花粉离体萌发率和花粉管长度的影响。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析(一) 研究方法:梨花粉萌发情况 统计分析过氧化氢酶活性测定 紫外吸收法过氧化物酶活性测定 愈创木酚氧化法超氧化物歧化酶活性测定 氮蓝四唑(nbt)梨花花柱上花粉管生长情况 荧光染色法(二) 实验方案1实验材料:采集翠冠梨开花前1 ~ 2 d 花蕾的花药,用硫酸纸包好,放在通风阴凉处风干,待花粉散出后置于变色硅胶中贮于20 ℃冰箱中备用2. 实验处理及测定内容:(1).在显微镜下观测花粉萌发率及花粉管生长长度。
花粉管长度大于花粉粒直径视为萌发。
每处理统计>100粒花粉和10 个花粉管,选取10个视野.花粉萌发率% = ( 花粉萌发数/花粉总数)* 100(2)外源ala对梨花粉酶活的影响每份 0.03g 新鲜花粉分别培养 0h,2h,4h,6h 后(培养方法与上同),冰水浴抑制花粉管继续生长。
4. 研究创新点
特色或创新之处(1)、外源ALA对梨花粉萌发的影响在还没有相关实验和文献报导,我们进行此项实验本身就是一个创新之处;(2)、本次项目研究ALA对梨花粉萌发影响及其与Ca2 和Fe2 的相关性,从一个新的角度研究ALA的作用,打破传统的束缚,为研究ALA的生理功能开辟了一个新的途径;(3)、本次研究将会使我对ALA的作用有着更深的了解,这为我们以后研究ALA在其他农作物的研究做下更好的铺垫;
5. 研究计划与进展
1.2013.32012.4 查阅文献,进行实验设计,采集实验材料并干燥贮存。
2. 2013.56月不同浓度外源ALA处理花粉,拍照并记录萌发率、花粉管长度及酶活(超氧化物歧化酶、过氧化物酶 、过氧化氢酶活性)3. 2013.8-9月在含ALA的培养基上加入不同浓度Ca2 、EGTA 记录各处理萌发率及花粉管长度4. 2014.22014.3月 研究ALA处理后梨花花柱上花粉管生长情况5.2014.45月 对收集的数据进行整理、分析、总结,做出相关的图表,完成论文
