10株大肠杆菌的ASPC和ADK基因的遗传型分析任务书

1. 毕业设计（论文）的内容和要求

用PCR法扩增10株人源大肠杆菌的ADK和ASPC基因并纯化回收，将回收产物插入T载体并转化克隆，筛选鉴定出正确的重组质粒测序。

对测序结果进行序列分析，初步判断这10株人源大肠杆菌的遗传进化关系和变异程度。

2. 实验内容和要求

内容：1.pcr法扩增目的基因2.pcr产物纯化回收3.将纯化的pcr产物插入t载体转化克隆并测序4.序列分析，初步判断10株人源大肠杆菌的遗传进化关系和变异程度。

要求：本实验要求熟练掌握pcr、琼脂糖凝胶电泳、pcr产物纯化回收、基因克隆以及碱裂解法提取质粒等一系列分子生物学及基因工程的基本实验操作。

整体实验流程性很强，需要实验者耐心且细心，参考查阅文献，不断摸索实验条件，发现并克服所遇到的难题。

3. 参考文献

1.王燕,谢贵林,杜琳.大肠杆菌O157∶H7感染流行概况[J].微生物学免疫学进展,2008(01):51-58.2.田生礼,梁秀怡,梁志成. T载体的应用及研究进展[J]. 科学技术与工程,2014,14(30):102-108 118.3.宦海霞,张科.大肠杆菌致病因子研究进展[J].中国家禽,2010,(23):45-48.4.崔天盆,周新. PCR产物快速克隆测序[J]. 临床检验杂志,1999(04):13-15.5.李明才,何韶衡. 一种高效、快速的大肠杆菌感受态细胞制备及质粒转化方法[J]. 汕头大学医学院报,2005(04):228-230 241.

4. 毕业设计（论文）计划

2022年3月：选题开题，查阅文献设计实验方法，准备开展实验。

2022年4月：开展实验，复苏菌株，提取模板进行pcr扩增，将pcrf产物纯化回收后连接t载体并转入dh5α感受态细胞，筛选鉴定正确的重组质粒测序。

2022年5月：完成实验工作，对实验结果进行分析归纳，得出结论，同时进行论文初稿撰写。