OsFWL4基因调控水稻分蘖数和产量的功能研究任务书

1. 毕业设计（论文）的内容和要求

2. 明确osfwl4基因无t-dna插入、无可检测脱靶效应的纯合突变体表型；

3. 初步解析osfwl4调控水稻分蘖数和产量的分子功能。

2. 实验内容和要求

1. osfwl4基因鉴定：明确osfwl4与其他植物fwl蛋白的系统发育关系，明确其基因在水稻全生育期以及镉处理下的表达模式；

2. osfwl4 crispr/cas9基因组编辑突变体的构建：构建osfwl4不同靶位点的crispr/cas9基因敲除载体，获得t₀代转基因植株，通过pcr扩增和测序等鉴定突变体的突变类型；

3. crispr/cas9诱导突变在后代的遗传及t-dna分离分析：在t₁和t₂代对osfwl4基因的靶向突变进行检测，研究突变的遗传；利用三对引物分别扩增hpt，sgrna和cas9转基因，对转基因后代中的t-dna分离情况进行分析；

3. 参考文献

[1] frary a, nesbitt t c, grandillo s, et al. fw2.2: a quantitative trait locus key to the evolution of tomatofruit size [j]. science, 2000,289(5476): 85-88.

[2] 陈明江, 刘贵富, 余泓, 等. 水稻高产优质的分子基础与品种设计[j]. 科学通报, 2018, 63(14):1276-1289.

[3] xu j, xiong w t, cao b b, et al. molecular characterizationand functional analysis of "fruit-weight 2.2-like" gene family inrice [j]. planta, 2013, 238(4):643-655.

4. 毕业设计（论文）计划

2022年01月-2022年06月，查阅相关文献，了解课题研究内容和意义；构建基因敲除载体，转化水稻品种中花11，获得t₀代植株；t₀代突变体基因型分析；

2022年07月-2022年12月，t₀代植株于正季种植，开展初步表型分析；osfwl4表达模式分析；

2022年01月-2022年06月，t₁代植株南繁加代；t₁代植株基因型分析；无t-dna插入纯合突变体的鉴定；基因脱靶效应分析；