内切葡聚糖酶基因（egl1）在巴斯德毕赤酵母中的表达任务书

1. 毕业设计（论文）的内容和要求

1.利用双酶切法获取目的基因egl2.

2.目的基因与表达载体的连接

3.重组子的转化

2. 实验内容和要求

内容：根据实验设计方案，将酶切获取的内切葡聚糖基因与pPICZαB载体进行连接后通过电转化法导入毕赤酵母表达菌株中进行相关蛋白的表达并进行相应检测，为后续的相关研究提供数据与参考。

要求：熟悉PCR,琼脂糖凝胶电泳，DNA回收，质粒回收，感受态制备与转化，电转化，双酶切等技术，学会微生物培养基的制备与摇床技术，并对实验过程有充分的了解悉知实验的意义。在实验完成后，对实验过程有相应的数据记录，形成论文文档（30页左右，8000字）与毕设汇报ppt。

3. 参考文献

[1]dowerwj,millerjf,ragsdalecw.highefficiencytransformationofe.colibyhighvoltageelectroporation[j].nucleicacidred,1998,16(13):6127-6145.

[2]覃玲灵,何钢,陈介南.里氏木霉及其纤维素酶高产菌株的研究进展[j].生物技术通报,2011(05):43-49.

[3]乔宇,毛爱军,何永志,等.里氏木霉内切-β-葡聚糖酶Ⅱ基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究[j].菌物学报,2004,23(3):388-396.

4. 毕业设计（论文）计划

4月初-4月上旬，进行实验方案的设计与文献查阅

4月1日-4月15日，通过双酶切法进行目的基因egl2的获取与回收

4月8日-4月15日，重组子的连接与转化克隆