水稻OsFWL4基因的CRISPR/Cas9突变体分析任务书

1. 毕业设计（论文）的内容和要求

1. 获得OsFWL4基因无T-DNA插入的基因敲除纯合突变体；2. 明确OsFWL4基因突变对水稻生长发育的影响；3. 明确OsFWL4基因在水稻不同组织器官及镉处理下的表达模式。

2. 实验内容和要求

1. osfwl4基因敲除突变体的获得。

利用crispr/cas9技术对osfwl4基因进行突变；2. 无t-dna插入纯合突变体的获得。

通过加代繁殖、pcr检测和测序等获得无t-dna插入的纯合突变体；3. 无t-dna插入纯合突变体的表型分析。

3. 参考文献

[1] guo m, simmons c r. cell number countsthe fw2.2 and cnr genes and implications for controlling plant fruit and organ size [j]. plant sci. , 2011,181(1):1-7.

[2] libault m, stacey g. evolution of fw2.2-like (fwl) and plac8 genes in eukaryotes [j]. plant signal. behav., 2010, 5(10): 1226-1228.

[3] nesbitt t c, tanksley s d. fw2.2 directly affects the size of developing tomato fruit, with secondary effects on fruit number and photosynthate distribution [j]. plant physiol., 2001, 127(2): 575-583.

4. 毕业设计（论文）计划

2022年09月-2022年12月，查阅相关文献，了解课题研究内容和意义；构建基因敲除载体，转化水稻品种中花11，获得T0代突变体；2022年01月-2022年06月，T0代植株南繁加代；基因镉处理下的表达模式分析；2022年07月-2022年12月，无T-DNA插入纯合突变体的鉴定；突变体表型分析；OsFWL4基因在不同组织器官中的表达模式分析；2022年01月-2022年05月，分析和整理实验结果，撰写论文。