开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究背景和立题依据
在全世界范围内，乳腺癌是在妇女中最常见的癌症，每年诊断估计有138万新病例[1]，并且大约70％的乳腺癌患者是雌激素受体阳性（ER ）。治疗ER 乳腺癌的首选药物是选择性雌激素受体调节剂，如他莫西芬（TAM）。然而，TAM耐药性的发生是临床上的一个常见问题。因此，寻找TAM耐药机制对乳腺癌的治疗有着重要的意义。
肿瘤的生长、发展与转移需要血管生成，血管生成会发生在肿瘤生长和新陈代谢等病态进程中[2]。导致乳腺癌的恶化的其中一个原因是血管生成。研究显示，乳腺癌的血管生成在一定程度上能促使乳腺癌细胞对TAM产生耐药性[3] 。
有研究表明，乳腺癌细胞对TAM产生的耐药性不是因为雌激素受体缺失或产生突变，而是因为其大量增殖和/或存活的途径发生了变化，从而抑制了TAM的治疗效果[4] 。胞外信号调控激酶(ERK)是发现的第1个丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),它调控多种重要的细胞生物学过程,包括细胞增殖、分化和凋亡等[5,6]。许多研究也表明PI3K/Akt通路的异常活化与乳腺癌的增殖和血管生成相联系[7]。此外，ERK信号的激活能上调ERRC蛋白，从而促进在ER 乳腺癌细胞对TAM的耐药性[8]。
假基因CYP4Z2P和正基因CYP4Z1的在乳腺癌样本中均呈现出过度表达，而在其他组织只有轻微表达[9]，且它们的表达存在相关性[10]。前期研究发现，假基因CYP4Z2P 3＇UTR及正基因CYP4Z1 3＇UTR均能够促进乳腺癌的血管生成[10，11]，且正基因CYP4Z1编码区也能通过促进乳腺癌的血管生成从而促进乳腺癌的发展[12]。后面继续研究表明，假基因CYP4Z2P 3＇UTR及正基因CYP4Z1 3＇UTR是通过形成竞争性內源RNA（ceRNA）调控网络，从而激活PI3K/Akt及ERK1/2信号通路，进而促进乳腺癌的血管生成[10]。
因此，基于以上分析，猜测CYP4Z2P 3＇UTR和CYP4Z1 3＇UTR能通过激活PI3K / Akt和ERK1 / 2信号通路来调控乳腺癌对他莫西芬的耐药性。
具体实验内容：
1、MTT实验
（1）分别将CYP4Z2P 3＇UTR（MCF-7-Z2P-UTR）和CYP4Z1 3＇UTR（MCF-7-Z1-UTR）稳定过表达的乳腺癌MCF-7细胞株（本实验室保存）及空白细胞株铺于96孔板中，每孔大约4000个细胞，每组细胞铺5个复孔,共3组。
