开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
【选题目的】
MicroRNAs (miRNAs)是一种由19~23个核苷酸组成内源性非编码RNA,对于细胞的生长、分化和稳态的调节具有重要意义。MicroRNAs (miRNAs)在许多生物学过程中发挥重要作用,并与多种疾病特别是癌症相关。然而,由于其家族丰度低、序列短、序列相似性高,使得miRNAs的灵敏和选择性检测面临巨大挑战。在众多扩增方法中,杂交链式反应(HCR)已被证明是核酸扩增的理想选择,特别是在复杂的生物环境中。本实验拟设计发卡探针(H1-bio、H2),由miRNA引发杂交链式反应从而实现对其的扩增,并通过横向流动试纸条检测技术对剩余引物H1进行检测从而实现对miRNA的间接检测。
【研究内容及手段】
设计发夹探针H1、H2并通过HCR反应对MicroRNA进行扩增,通过核酸非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳验证其反应,并对其反应条件进行优化。设计相应的探针,对剩余的发夹探针H1-bio利用设计的横向流动试纸条进行检测,从而实现对MicroRNA的间接检测。研究过程中用到BSA124S224S 万分之一电子分析天平、Mini-15K 高速离心机,Kylin-bell 旋涡混合器 VORTEX-5、Tanon-1600B 凝胶图像处理系统、Zeta电位仪等。
【成果形式】
凝胶电泳色谱图、紫外吸收光谱图、试纸条
【工作进度】
已完成相关的核酸序列设计,完成了HCR反应及其优化
【文献综述】
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