一、课题背景
疼痛的产生过程比较复杂，涉及到疼痛感受器、传导神经、疼痛中枢等因素。引发疼痛的原因主要有以下几点：外界存在的一系列机械性刺激以及发生炎症反应时组织的局部水肿，会压迫神经末梢引起疼痛；物理及化学性质的刺激会通过感觉神经元使痛觉中枢产生兴奋，引起疼痛；周围神经的病理性损伤使交感神经纤维受到刺激，最终刺激大脑皮质过度兴奋，引起神经病理性疼痛；机体受到外界刺激后由损伤细胞或者伤害性感受器释放的致痛物质会刺激局部感受器，使中枢神经系统兴奋引起疼痛。
早期的镇痛药大致可以分为非甾体类（如阿司匹林）、阿片受体类（如吗啡）以及其他辅助性镇痛药（抗惊厥）。它们对于慢性疼痛、神经病理性疼痛以及炎症都具有较好的疗效，但其毒副作用一直是瓶颈问题，得不到很好的改善。例如阿司匹林对人体循环系统损伤较大，尤其是消化与造血系统；吗啡具有严重的成瘾性、耐受性、呼吸窘迫等一系列不良反应。因此，发现安全高效的新型镇痛物质一直是药学工作者们研究的课题。作用于离子通道等新靶点的多肽类药物具有更强的药效，且避开了传统镇痛药的上述问题，因而受到广泛关注。因而本实验室自主设计了镇痛肽C1，具有较高的镇痛活性，但其毒理仍未深入研究。
秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans， C. elegans） 是经典的模式生物， 已广泛用于发育生物学的模式生物， 成为一个受欢迎的毒理试验生物。 发育毒理学应用主要集中在观察而不是机理研究。 毒性终点包括生长指标（孵化率、 急性致死性、 生长发育、 种群数、 生殖后代数） ， 神经系统指标（运动行为身体弯曲和头部摆动） ， 寿命和半数致死天数， 信号途径和基因表达等 。 一些化合物利用线虫进行了有效的药理和毒理筛选。 同时， 能够通过线虫进行高通量药物活性筛选。 但线虫筛选生物制剂、 蛋白质及多肽类药物毒性的报道并不多见。 因而本课题采用秀丽隐杆线虫作为模式生物，分析镇痛肽C1的急性毒理、慢性毒理和生殖毒性。
- 要解决的问题
以秀丽线虫作为模式生物，分析实验室自主设计的镇痛肽C1的初步毒理，主要包括急性毒理（孵化抑制率、致死率）、慢性毒理（线虫神经系统、线虫体长发育、线虫种群数、线虫寿命）和生殖毒性（育雏数、生殖细胞凋亡）。
- 可行性分析
所用秀丽线虫模型为本实验室常用模型，技术成熟。镇痛肽C1为本实验自主设计与合成的具有独立知识产权的多肽，采用秀丽线虫模型评价镇痛肽C1的毒理安全可靠，可行性高。
- 研究方法和内容
1.实验对象：秀丽隐杆线虫
2.实验试剂：多聚蛋白胨 、酵母提取物 、琼脂粉、次氯酸钠溶液、胆固醇、氯化钙、氯化钠、硫酸镁、十二水磷酸一氢钠
3.实验方法： 构建秀丽线虫模型，将其依照多肽剂量分组，通过检测各组孵化抑制率、致死率、线虫神经系统、线虫体长发育、线虫种群数、线虫寿命、育雏数、生殖细胞凋亡指标评价镇痛肽C1是毒理。
- 工作计划
2月28日—3月17日：完成文献查阅、开题报告等前期工作。
