开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、研究背景
溃疡性结肠炎是指发生于结肠粘膜的慢性炎症性及溃疡性反复发作的肠病。现代医学认为溃疡性结肠炎的发生主要与免疫,遗传,肠道微生物和环境等因素相关。其中,肠道免疫失调是其中重要的发病因素之一。
葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium DSS)是由蔗糖合成的肝素样硫酸多糖体,有抑制血液凝固,血小板聚集,增强纤维蛋白溶解活性的作用。同时,DSS也是构造小鼠溃疡性结肠炎模型的比较理想的诱导剂。DSS通过以下作用诱导小鼠溃疡性结肠炎的发生:对肠道上皮细胞的主要毒性作用;改变结肠粘液菌群的变化;使结肠紧密结合蛋白和紧密连接相关蛋白如咬合蛋白(occludin),钙黏蛋白(cadherin),闭合蛋白(claudin)和beta;-连环蛋白(beta;-catenin)等的异常表达进而破坏结肠粘膜屏障的紧密性;诱导炎症细胞因子之间发生变化;影响STAT相关细胞通路,NF-kB细胞通路,Wnt相关细胞通路等信号通路发生异常;诱导肠道菌群失调等。
临床研究表明,用葛根芩连汤为基础结合西药的方法治疗溃疡性结肠炎常常获得较好的疗效,有关于葛根芩连汤联合西药治疗的治疗方法主要分为内治法,外治法和内外兼治法,其中,内外兼治法的疗效优于单纯内治法或外治法,且不良反应少。根据葛根芩连汤治疗溃疡性结肠炎的效谱关系研究表明,葛根芩连汤发挥药效作用的主要成分是葛根素、大豆苷、黄连碱、表小檗碱、盐酸药根碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、汉黄芩苷、黄芩素、甘草酸铵等多种成分的共同作用结果。
本课题将采用C57BL/6小鼠,利用DSS制备急性溃疡性结肠炎模型,并用葛根芩连汤治疗。考察给药后小鼠体内Th1,Th2,Th17和Treg的水平,确定葛根芩连汤对Th1/Th2,Th17/Treg的调节作用,证明葛根芩连汤恢复溃疡性结肠炎小鼠的免疫平衡,从而治疗溃疡性结肠炎。
二、研究内容和研究目标
2.1.研究内容
本课题主要通过DSS肠道灌注给药来构建小鼠溃疡性结肠炎模型,借助肠道通透性试验来诊断溃疡性结肠炎的发病程度,并采用肠道灌注给药的方式用葛根芩连汤对患有溃疡性结肠炎的小鼠进行治疗。在整个过程中用流式细胞术对肠道中的各种免疫细胞的细胞数目及状态进行测定。
2.2.研究目的
