Alb-cre转基因小鼠中表达cre重组酶的组织分布
【选题依据和主要意义】
Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分子量约38kDa。它可以识别催化两个LoxP位点之间发生同源重组，从而造成DNA的缺失、易位等现象。这一特性在基因工程操作中得到多方面的应用，尤其在诱导型基因剔除（Gene Knockout)小鼠的建立中应用得十分成功，因为通过可诱导表达cre酶的转基因小鼠与从ES细胞途径获得的工程小鼠交配，就能有效地获得诱导型基因剔除小鼠。为此，建立可诱导表达cre的转基因小鼠，对于建立制备诱导型基因剔除小鼠至关重要，而且对于某些采用cre-LoxP系统进行体内研究的项目来说也是必不可少的。
Cre重组酶在介导重组反应时,不需要其它蛋白质、DNA等辅助因子和额外能量的参与,仅需纳摩尔的量即可与loxP位点结合,完成体内或体外的DNA的重组,将外源基因定点整合到染色体上或将特定的DNA片段删除;而且Cre重组酶可以对包含loxP位点的各种DNA底物进行重组反应,如线性的、超螺旋的、有缺口的环状DNA分子。正是由于Cre-loxP定位重组系统这种高效简单的作用方式,它已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基因捕获及染色体工程等方面得到了有效的利用,在转基因的酵母、植物、昆虫、哺乳动物的体内外DNA重组方面成为一个有力的工具。
Alb（albumin，即白蛋白）由肝实质细胞合成，是不含糖的单链多肽。白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆蛋白质总量的40%～60%。分子量为66.5KD，由585个氨基酸残基构成的。半寿期约15 -19天。又名清蛋白。
Alb-cre小鼠是白蛋白启动子介导的cre重组酶转基因小鼠。将Alb-cre小鼠与GABA A/B(gamma;-氨基丁酸A受体或B受体)受体条件基因loxP打靶的小鼠交配，利用PCR对cre重组酶介导重组的组织特异性进行检测，观察转基因小鼠中表达cre重组酶的组织分布，从而判断cre重组酶的表达是否具有组织特异性。
【拟研究或解决的问题】
1、GABA A/B 受体特异性敲除小鼠的构建和繁育
2、Alb-cre小鼠表达cre重组酶的组织分布
