磷酸胆碱胞苷转移酶工程菌的酶活性测定及工程菌底物诱导的研究文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

一、选题依据：

胞磷胆碱，又名胞苷二磷酸胆碱，中国药典2015年版定名为胞磷胆碱，英文名：CDP-choline，它的化学名称：胆碱胞嘧啶核苷-5-二磷酸酯。其商品名：Nicholin，中译名：尼柯灵。上世纪50年代由kennedy博士等人发现并确定分子结构，而后Rossiter等阐明其功能。70年代初，日本武田制药株式会社研发并用于治疗脑外伤，脑手术伴随的意识障碍的I临床获得成功[1]。

胞磷胆碱是卵磷脂生物合成的前体，当大脑功能下降时，脑组织内的卵磷脂含量显著减少。补充外源性胞二磷胆碱即能激活卵磷脂的生物合成，刺激脑干网状结构的兴奋，提高苏醒阈值，恢复神经组织机能，改善脑代谢和神经传导，提高患者的意识水平。与蛋白分解酶抑制剂合用, 可保护及修复胰腺组织；是用于治疗脑震荡，神经官能症，中风后遗症，帕金森氏综合症、脂肪肝等疾病的较好药物。且胞二磷胆碱毒性极小，疗效确切，使用安全，为优良生化药之一[2]。

胞二磷胆碱的合成方法主要有化学合成法、微生物合成两种方法。由于化学合成法成本较高，且需在有机溶剂中进行，环境污染较严重，所以目前的主要生产方法以酵母生物合成为主[3]。我国从1975年开始陆续报道，利用啤酒生产中的下脚料湿酵母等为原料，催化CMP与磷酸胆碱或氯化胆碱转化生产胞二磷胆碱，转化率在80%左右。但由于每一批次啤酒生产所剩的废酵母都不一样，发酵过程的工艺条件也不一样，此来源的酵母不能直接应用于大生产。所以本课题主要解决的问题是找到一种能够提高胞二磷胆碱产率的并且能够稳定遗传的基因工程酵母，最终能够稳定的用于工业大生产。

二、实验目的

本实验主要通过基因工程的手段先获得磷酸胆碱胞苷转移酶的工程菌，为了验证此工程菌在工业生产上的应用价值，对其进行酶活性的测定，验证工程菌与正常菌株相比生产胞二磷胆碱的关键酶活性是否有显著提高。并通过对工程菌进行底物诱导的手段处理，以提高酵母转化制备胞二磷胆碱的生物转化率。

三、文献综述：

【题目】：探究生物合成胞磷胆碱的文献综述

【摘要】：胞磷胆碱的合成方法主要有化学合成法、微生物合成两种方法。由于化学合成法成本较高，且需要在有机溶剂中进行反应，环境污染较为严重，所以目前工业生产上主要采用酵母生物合成法。本文主要通过查阅国内外相关文献并对其进行整理分析，总结出了胞磷胆碱的各种生物合成法的特点，对各种生物合成法进行综述。