- 文献综述（或调研报告）：
恶性黑色素瘤是最难化疗的肿瘤之一。常用的抗癌药物并不能显著改变进展性疾病的预后。单药或联合化疗对恶性黑色素瘤患者的疗效不佳。基于烷基化剂达卡巴嗪的转移性黑色素瘤的标准治疗常常导致不良结果，而化学疗法的组合仅显示出稍高的反应率，付出了系统毒性的代价。如此不令人满意的待遇强调以新的、更有效的、可能毒性更小的方法实施恶性黑色素瘤治疗策略的紧迫性。尽管在临床前研究中已经提出了一些肿瘤对各种细胞毒药物的耐药机制，但前者似乎在肿瘤患者中没有明确的作用，这对于那些对化疗没有反应而没有抵抗力的肿瘤，如黑色素瘤，显得更加明显。顺铂（CisPt）是一种烷基化剂，它与DNA碱基结合，导致DNA链的交联和断裂；干扰DNA复制。CisPt的摄取受损似乎代表了体内外对该药物耐药的细胞最一致的特征，与其他拟议机制相比，CisPt进入细胞的机制尚不清楚，但早期的证据表明，与大多数抗癌药物相比，CisPt进入细胞的速度相对较慢，而CisPt的外排则迅速发生在细胞外室和细胞内室。事实上，一个众所周知的耐药机制是一个反向的pH梯度，它代表了恶性肿瘤的特征，随着酸性细胞外pH（pHe）和碱性细胞外pH（pHe）的发展肿瘤细胞胞浆室pH值。所谓的“沃伯格效应”是指细胞外乳酸累积引起的细胞外酸性机制。然而，这种细胞外酸性可以想象地选择质子泵活性上调的细胞，一方面增加细胞外空间和内部囊泡的酸性，另一方面可能导致细胞内室碱化，因为它发生在耐药细胞系。一些报告提出，酸性囊泡在细胞毒性药物抵抗中的作用，通过将低碱性药物隔离和中和到酸性细胞器的腔中，以及可能消除药物从细胞通过囊泡介导的分泌途径。空泡ATPase（V-ATPase）是一种质子泵用于溶酶体的酸化和囊泡交通的调节。在癌细胞V-atp酶参与了pHi及其受体的调节表达和亚细胞定位与转移能力和多药耐药。在过去的30年里与V-ATPase抑制剂相似，在治疗消化性疾病中，V-ATPase抑制剂通常被用作一种抗酸药物。前者被称为质子泵抑制剂（PPI），包括6个分子，都属于同一家族。PPI治疗人类肿瘤细胞系和肿瘤明显地诱导了多种化疗药物的癌症敏感性。这种效应与抑制人体肿瘤细胞中酸性囊泡的释放和运输一致。CisPt也可能被隔离到属于分泌途径的溶酶体和小泡中。在人类卵巢癌细胞中，溶酶体和质膜蛋白参与CisPt的流出，CisPt的流出来源于跨高尔基体网络，通常被输送到多泡体，随后在溶酶体中被破坏或通过外显体分泌到细胞外环境中。外体是由多种正常细胞和肿瘤细胞释放的内吞性纳米囊泡。外体具有多种生物功能，包括调节免疫反应、抗原递呈、细胞间通讯以及RNA和蛋白质的细胞间转移。我们最近发现，低苯丙氨酸诱导人类黑色素瘤细胞外体释放增加，并通过缓冲肿瘤细胞环境或PPI治疗抵消低pH值，显著减少癌细胞外体释放。
口腔鳞状细胞癌（OSCC）是头颈部的主要肿瘤癌症。OSCC的特点是局部浸润与颈淋巴结高转移率。化疗是OSCC最常见的治疗方法，它给晚期癌症患者带来许多好处，包括减少肿瘤的发生，减少远处转移，改善预后。然而，对抗癌药物的耐药性是OSCC化疗有效性的主要障碍，导致化疗失败，顺铂是第一代抗癌药物，常用作OSCC的一线化疗方案。顺铂在口腔鳞癌化疗中的应用常因以下原因失败固有和获得性耐药的迅速发展，限制了其应用。顺铂耐药的细胞防御机制包括多种进展，如增加药物解毒、DNA修复和细胞周期的变化检查点，减少细胞凋亡。基本上还是未知的。因此，对分子机制的研究是必要的。
MiR-21已被证明能调节细胞分化、增殖和凋亡，并有助于肿瘤的发展。MiR-21在实体肿瘤和血液肿瘤中被发现与多种化疗药物的耐药性有关。尽管肿瘤源性外体miRNA的特征在许多类型的肿瘤中已经被识别和研究，但是来源于顺铂耐药癌细胞的miRNA的外体特征还没有被完全研究和阐明。在本研究中，抗顺铂的OSCC细胞株（HSC-3-R开发了SCC-9-R）和用顺铂耐药的OSCC细胞研究其是否能增强亲本OSCC细胞的耐药性。它是发现外体参与了亲本的抗药性抗药性细胞转移的OSCC细胞。来源于抗顺铂的OSCC细胞可以将miR-21转移到OSCC亲本细胞，并通过靶向磷酸酶诱导顺铂耐药与张素同源物（PTEN）和程序性细胞死亡4（PDCD4）。此外，皮下异种移植小鼠模型为证实抗顺铂OSCC细胞外体在体内的作用而建立。
膀胱癌（BC）是泌尿生殖系统中的一种侵袭性肿瘤。可向邻近组织（如前哨淋巴结）转移和侵袭。尽管有早期发现和常规治疗，如手术切除、化疗和放疗，提高了治疗效果，但5年生存率由于化疗药物耐药，如顺铂（DDP）耐药，许多患者仍患有BC。因此，阐明BC患者化疗耐药机制可能为减少BC患者复发提供新的策略。长的非编码rna（lncRNAs）通过参与细胞周期、生长、分化、诱导、转移、凋亡和耐药性，在许多疾病中起着重要的调节作用。6-8个外显子是细胞分泌的囊泡，它们能在肿瘤和细胞外微环境之间转移和交换LncRNA。9个定位于10号染色体上的LncRNA-PTEN假基因-1（PTENP1）被认为是减少肿瘤发生的抑癌因子
MicroRNAs（miRNA）是在转录后水平上调节基因表达的非蛋白编码的小rna。它们通过调节细胞代谢，参与许多疾病的病理过程，如细胞的吞噬、迁移、自噬、凋亡和耐药性，miR-103a表达减少通过激活海马星形胶质细胞改善癫痫诱导的大鼠神经元损伤miR-103a还与BDNF.18相互作用，通过调节Runx2发挥机械敏感基因的作用，抑制骨形成。此外，miR-103a参与了多种癌症的发生。例如miR-103a通过与c-Myb或ADAM10相互作用抑制胃癌或腹主动脉瘤的恶化，因此我们认为PTENP1可能通过竞争性结合miR-103a来调节细胞的增殖、迁移和耐药性。
宫颈癌是女性第四大常见癌症，占世界女性癌症死亡的7.5%。CC仍然是东非和中非最常见的癌症。据报道，人乳头瘤病毒（HPV）是引起CC的主要原因之一，而其他外感危险因素与多个伴侣有性关系，或早期性行为，以及吸烟，也可能导致CC风险。Tere可能是遗传因素对HPV感染进展为宫颈癌前病变和CC风险的影响。有人认为CC的标准一级治疗包括放疗（RT），或根治性子宫切除术伴盆腔淋巴结清扫（RHND），或联合RT和铂类化疗。顺铂（DDP）是一种广泛应用的治疗CC的有效化疗药物，其有效性受到耐药发展的限制。因此，对新的预后标志物的识别可能有助于对CC进行更个性化的治疗。长非编码rna（Long non-coding RNAs，lncRNAs）是一种具有200多个核苷酸的非编码转录物，缺乏蛋白质编码的潜力。外体对内体形成的细胞信号传输和通讯有很大的影响。在外显子中发现了LncRNAs，进一步证明了它们在肿瘤发展和药物治疗中的真正生物学功能抵抗。长非编码RNA HNF1A反义RNA（lncRNA HNF1A-AS1）是位于12q24.31号染色体上，全长2455个核苷酸的HNF1A天然反义转录本。HNF1A-AS1在多种人类肿瘤中均有异常表达，可作为肿瘤诱导基因或抑癌基因。一项研究表明，HNF1A-AS1的修复促进了体外非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭、细胞周期和迁移。另一项研究显示，HNF1A-AS1的过度表达预示着口腔鳞癌患者预后不良。LncRNAs被认为是参与调节miRNA表达的内源性RNA（ceRNA）网络中microRNA（miRNA）海绵的竞争。miRNA是一种内源性的非编码RNA小分子（长19-22碱基），与mRNA 3′-非翻译区（3′-UTR）的不完全序列同源位点结合，导致蛋白质翻译的降解或抑制。Tere是一项强调miR-34b在调节CC细胞增殖和凋亡中作用的研究[16]。丛生蛋白1（TUFT1）是一种酸性蛋白，存在于牙齿的发育和矿化组织中。据报道，在乳腺癌组织中，TUFT1的表达显著增加。一项研究表明，TUFT1是多种癌症预后不良的一个因素。基于上述证据，我们的研究旨在探讨携带HNF1AAS1的CC衍生外体是否可以作为miR-34b的竞争性内源性RNA（ceRNA）来增加TUFT1的表达，从而抗DDP、抑制CC细胞增殖和凋亡。Tus，在这项研究中进行了一系列的实验来证明这一假设。
