1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
课题的意义：磷脂酶d(phosplohipase d,简称pld)，分布在从细菌到高等动植物的许多生物类群中,其主要生理功能是参与细胞脂质代谢,信号转导及生物膜形成等。
植物磷脂酶d能参与细胞的信号转导过程，能通过信号传递对逆境条件进行响应，调整自身对环境的适应能力。
本实验将使用拟南芥作为研究对象，主要探究磷脂酶d与植物耐盐机理的关系。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：为pldα1和pldδ的t-dna插入功能缺失突变体双突变体的鉴定及其盐处理表型验证。
研究内容：本实验以wt，pldα，pldδ-1，pldδ-2，pldζ-2及双突变体pldα1 pldδ-1和pldα1 pldδ-2幼苗为实验材料，研究pld蛋白及磷脂酸（pa）在拟南芥响应盐胁迫中的作用。
拟解决的关键问题：本实验需要解决的问题为通过观察突变体植株在盐胁迫下的表型，判断pld蛋白对拟南芥耐盐胁迫能力的影响，以及通过加入外源蛋白，判断各类pld蛋白对拟南芥应答盐胁迫的机理是否是通过对pa的调控来完成的。
3. 研究的方法与方案
研究方法：将pldα1和pldδ（两个不同插入位点的突变体）进行杂交，繁殖后从基因组、转录本和蛋白表达水平筛选纯合体；拟南芥幼苗在1/2ms培养基上生长7天后，转移至125mm nacl培养基处理5-7天，测量各遗传材料主根根长，鉴定其盐表型；分析外源pa对突变体盐表型的缓解作用。
技术路线：见附件实验方案：①将pldα1和pldδ突变体进行杂交，繁殖后从基因组、转录本和蛋白表达水平筛选双突变体植株纯合体。
②先将幼苗在1/2ms培养基上培养，后转移到125mm nacl培养基培养，并选择部分植株进行加入外源pa的培养。
4. 研究创新点
本实验除了进行PLD对植物应答盐胁迫的影响之外，还进行了加入外源PA的实验，一方面可以观察外源PA对突变体植株盐表型的缓解作用，另一方面可通过观察结果判断PLD蛋白影响盐胁迫应答的机理是否是通过调节PA来完成的。
5. 研究计划与进展
研究计划：本实验主要由三部分组成，第一部分为pldα1和pldδ突变体植株进行杂交，繁殖后从基因组、转录本和蛋白表达水平筛选出双突变体植株纯合体。
第二部分为得到纯合体植株之后，将突变体植株与空白组植株先在1/2ms培养基上进行培养后在125mm nacl培养基上处理，并测量主根根长以鉴定其盐表型。
第三部分为向突变体植株提供外源pa并观察其对盐表型的缓解作用，以判断pld蛋白对植物耐盐胁迫的调控是否是通过对脂类介质pa的调控来完成的。
