1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题着重研究h9n2禽流感的ha基因和na基因的测序,和对基因序列进行比对和研究,研究其基因变异情况。然后以该毒株做灭活疫苗进行免疫实验
禽流感(avian influenza,ai)是因为禽类、鸟类、以及部分哺乳类感染了正黏病毒科a型流感病毒属禽流感病毒引起的急性传染病[1]。禽流感病毒的病毒亚型众多,一种亚型所产生的抗体只对同种亚型病毒有抑制作用,但对不同亚型的病毒没有作用[2-4]。这就对我们关于禽流感病的防治工作带来了巨大的困难。而且现实中人们对h5n1这种高致病性的亚型研究比较深入,控制的也比较好,但是对h9n2这种中等毒力的禽流感研究的比较少,人们关注度也不是很高[5-7]。但是在禽类养殖中,h9n2这种亚型对禽类养殖业带来的损失才是最大的,而且目前发现这种病毒不仅引起禽类的上呼吸道感染,而且有些毒株还可以感染给人,所以对h9n2亚型的研究就显得至关重要,具有很重要的公共卫生学意义。
近些年h9n2已经在全国多个地区广泛流行,这种亚型对养殖业带来巨大损失,并且在不断变异,毒力有所增强。
2. 研究的基本内容和问题
本目标在于通过最新、最全的方法对h9n2的基因进行测序和分析,以便用于实验室的下一步研究工作。
通过提取rna;rt-pcr检测;t载体的连接,酶切测序几个方面对ha和na基因进行同源性分析,分析基因的同源性
h9n2亚型病毒,传播广泛,且毒力有增强的趋势,研究其基因,分析基因变异程度,为接下来的防治工作提供理论依据
3. 研究的方法与方案
1.mrna的提取;
2.反转录成cdna
3.pcr扩增目的基因
4. 研究创新点
人们现在对高致病性禽流感研究的比较深入,而对这种低致病性禽流感研究的很少,而在临床上低致病性禽流感带给养殖业的损失才最大。本次试验的创新之处在于,在测序基因出来后对序列进行分析,找出B细胞表位优势位点。通过收集毒株制备灭活疫苗,免疫动物,从抗体水平,T细胞亚型及淋巴细胞的增殖多个方面进行检测
5. 研究计划与进展
2017.3查阅文献,了解背景知识,收集病料,以便实验安排。
2017.4对采集的病料,饲养小鼠,对小鼠进行免疫采血进行实验室检测。
2017.5撰写毕业论文,准备答辩。
