大豆GmWRKY39基因功能研究及RNAi载体的构建开题报告

 2022-02-08 20:15:00

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

在植物的生长发育、应答外界环境生物、非生物刺激等各种生理生化反应过程中,存在复杂的调控网络。

在参与调控网络的各种组分中,转录因子具有十分重要的作用。

转录因子(transcription factor, tf)又称为反式作用因子,是一类能与真核基因启动子区域中的顺式作用元件(cis-acting element)发生特异性互作、对转录具有激活或抑制作用的dna结合蛋白。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标与内容1、 获得大豆GmWRKY39基因特异片段克隆2、 利用Gateway技术构建大豆GmWRKY39基因的RNAi载体3、 将构建的好的载体转入发根农杆菌K599拟解决的关键问题1、 准确找到大豆GmWRKY39特异片段用于载体构建2、 摸索载体构建体系,确保载体成功构建

3. 研究的方法与方案

研究方法与技术路线1、 首先通过比对寻找大豆GmWRKY39的特异片段,并将其扩增出来2、 通过BP反应将扩增得到的特异片段导入入门载体3、 利用LR反应将目标片段由入门载体置换到目标沉默载体中4、 将构建好的载体转化进入发根农杆菌K599

4. 研究创新点

特色或创新之处 对大豆基因功能验证的一般方法是转基因功能验证,由于转化其它作物得到的结果说服力不强而转基因大豆的周期较长。

我们拟利用发根农杆菌接到的大豆根毛转化来验证基因功能,这样就能缩短实验周期同时可以筛选功能更好的基因进行遗传转化更能研究。

本实验中我们通过载体构建及农杆菌转化为后续基因功能研究提供基础。

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5. 研究计划与进展

研究计划及进展2016.08.01-2016.08.15完成大豆GmWRKY39基因特异片段的克隆2016.08.16-2016.09.15利用Gateway技术构建大豆GmWRKY39基因的RNAi载体2016.09.15-2016.09.30将构建好的载体进行农杆菌转化

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