1. 研究目的与意义
作为新一代仿生学纳米粒子,细胞膜包被的纳米粒子组合天然膜的功能合成纳米材料,在载药方面被证实在各种治疗中有巨大的发展潜力。
细胞膜的分离技术是近代在分子生物学和细胞学经常采用的方法。研究细胞膜的生物性质和功能时,分离细胞膜多为必不可少的方法.近几年,研究发现细胞膜包覆功能微球在载药领域的优势显著。细胞膜的分离技术始于上世纪六十年代,最开始在大鼠肝细胞方面由neville (1960)用超高速离心加上相差显微镜的方法测试出细胞膜的分离方法,随后进行多次改良,加入添加浓度梯度等操作。现在大概有差速离心,密度梯度,两相分配等方法。
随着纳米技术的最新进展,已有许多策略实施纳米粒子的免疫逃避。目前,最广泛采用的免疫逃避策略是peg功能化。这些亲水聚合物将纳米颗粒隐藏在水合层后面并降低其免疫清除率。纳米粒子用聚乙二醇(peg)或其它亲水性聚合物,被伪装成红血球来逃避免疫系统在红细胞膜表面上被识别为自我标记,抑制巨噬细胞并阻止其摄取,亲水性聚合物的相容性较好,但不能达到持续长久释放的目的,当这种材料吸水后药物就会很快释放出来,并且其载药量仍然有待提高。
2. 研究内容和预期目标
采用细胞膜包覆纳米粒子用于载药的研究一直以来都备受关注,此项研究对于降低对药物的排斥性,提高药物靶向性和载药量有很大贡献。本论文欲现将细胞膜分离,在把制备的双层结构的微球包覆在内。细胞膜的分离技术是近代在分子生物学和细胞学经常采用的方法。研究细胞膜的生物性质和功能时,分离细胞膜多为必不可少的方法。现研究领域主要有差速离心,密度梯度,两相分配,化学试剂诱导法这些方法。
超声波细胞破碎是一种利用强超声在液体中产生空化效应,对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器,能用于多种动植物细胞、病毒细胞的破碎,同时超声波细胞破碎仪可用来乳化、分离、匀化、提取、消泡、清洗及加速化学反应等。
高压电喷雾技术(electrohydrodynamic atomization,ehda)是近年来兴起的较有应用前景的制备技术之一。静电喷雾过程中,微小的液滴溶剂不断挥发,固化成为微纳米颗粒,随后落在接收屏上,这种方法可收集到粒径单分散的微纳米颗粒。因其通过这种方法可以产生高质量且单分散、直径在微纳米尺度的微球。所以在纳米微球领域被广泛运用。本课题将利用该高压电喷技术结合超声法制备具有核壳结构的细胞膜包覆可降解微球,优化制备条件,开发组成结构合理、性能优良的核壳结构微球。
3. 研究的方法与步骤
试剂:
红细胞膜,乳酸羟基乙酸共聚物(plga),无水乙醇
步骤:
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
1、查阅文献资料,完成开题报告(2022-2022-1学期17~20周、2022-2022-2学期第1~3周)查阅中外文献资料,综述国内外研究现状和发展趋势等,并进行外文资料翻译。
2、 高压电喷结合超声作为细胞膜分离技术的研究(第4~9周)
探索交替高压电喷与超声技术结合使细胞膜实现分离,作为物理手段实现先破膜再分离。达到细胞膜分离后细胞膜的完整性,获得纯度较高的细胞膜,并且产率较高的同时活性还不受影响。研究得到细胞膜包覆膜优化制备条件,探究制备工艺对细胞膜结构性能的影响规律。
