1. 研究目的与意义
“阿龙尼亚果”是黑果腺肋花楸的果实。黑果腺肋花楸,又名野樱莓,不老莓,英文名aronia和black chokeberry,蔷薇科,腺肋花楸属、多年生落叶灌木。原产于北美东北部,波罗的海沿岸至太平洋沿岸均有分布。黑果腺肋花楸是集食用、药用、园林和生态价值于一身的珍贵树种。果实富含黄酮、花青素和多酚等物质,其提取物对治疗心脏病、高血压等心脑血管疾病有特效。可以在我国年降水量500mm,极限低温-40℃,土壤ph8.0的三北地区栽培。而我们现在就是提取其中的花青素并对其进行响应面和抗氧化活性研究。
花青素是一类存在于植物中的水溶性天然色素,属黄酮类化合物。可以随着细胞液的酸碱改变颜色,细胞液呈酸性则偏红,细胞液呈碱性则偏蓝。花青素(anthocyanidin)是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一。花青素为植物二级代谢产物,在生理上扮演重要的角色。花瓣和果实的颜色可吸引动物进行授粉和种子传播 (stintzing and carle, 2004)。常见于花、果实的组织中及茎叶的表皮细胞与下表皮层,部分果实以颜色深浅决定果实市场价格,在紫色蔬菜内也有。花青素在自然状态下常与各种单糖形成糖苷,称为花色苷。花色苷是马尔夸特1835年首先用来命名矢车菊花朵中的蓝色提取物时提出,现在作为同类物质的总称。
花青素是羟基供体,同时也是一种自由基清除剂,它能和蛋白质结合防止过氧化。tsuda等用亚油酸自动氧化系统、脂质体系统、兔血红细胞膜系统和鼠肝粗粒体系统对矢车菊色素-3-葡萄糖苷和矢车菊色素的抗氧化活性进行了实验,结果发现它们具有α-生育酚同样的活性或α-生育酚的抗氧化活性更强。而且花色苷在ph变化后形成的假碱、喹啉碱和查尔酮也比儿茶素的抗氧化活性要强。同样,wang等用氧自由基吸附系统评价了天竺葵色素等14种花色苷的清除过氧自由基的能力,结果证明所有花色苷都具有明显的清除作用。红葡萄酒中的花色苷清除超氧自由基的能力比单宁还高,而且一定聚合度的花色苷比单个花色苷分子的清除效果更好。由于目前许多证据表明自由基可导致脂肪、蛋白质和核算的氧化损害,是一些疾病如癌症、心血管疾病和神经性疾病的重要病因,所以花色苷也就是花青素的抗氧化活性研究对这些疾病的预防会有非常重要的作用。
2. 研究内容和预期目标
本论文研究主要内容如下:
(1)“阿龙尼亚果”挑选、准备与处理,为后续试验提供合适的原料。
(2)对“阿龙尼亚果”花青素进行分离纯化;
3. 研究的方法与步骤
(1)溶液的制备:ph=1.0和ph=4.5的缓冲液,不同乙醇浓度的提取剂及标准品的标准曲线绘制,
标准曲线制作: 对照品溶液精密称取花青素对照品2 mg,置于5 ml 棕色量瓶中, 甲醇定容至刻度, 摇匀, 即得0. 4 mg /ml对照品母液,4 ℃下避光保存。
精密吸取对照品溶液1 ml,加1 ml甲醇稀释至0. 2 mg /ml。再精密吸取0. 05、0. 1、0. 15、0. 2、0. 25 ml,置于5 ml 棕色量瓶中,ph 1. 0、4. 5 的缓冲液(见下文的配方)稀释至刻度,得2、4、6、8、10 μg /ml 溶液。以蒸馏水为对照,于510 nm 和700 nm 波长处测定吸光度,以吸光度( a) 对质量浓度( c) 进行线性回归,得标准曲线方程。
4. 参考文献
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5. 计划与进度安排
本论文的各阶段安排为:
1、2016-12-28~2017-03-10接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告;
2、2017-03-12~2017-03-15“阿龙尼亚果”挑选、准备与处理,为后续试验提供合适的原料
