1. 研究目的与意义
随着人口老龄化程度日益加剧，血栓性疾病的发生率不断上升，抗凝药物迅速扩容。比伐卢定在2000年经美国食品药品管理局批准上市，是直接的、特异的、可逆的凝血酶抑制剂，具有抗凝效果的可预测性、不诱导血小板减少及对纤维蛋白结合的凝血酶有效等优势，克服了肝素、水蛭素的局限性。早期的临床研究显示：比伐卢定抗凝治疗效果确切，且出血事件的发生率较低，和传统的肝素抗凝治疗相比使用更为安全。为了证明比伐卢定在急性冠状动脉综合征（acs）患者治疗中的有效性和安全性，研究者设计了acuity临床研究。
比伐卢定(bivalirudin)为新型抗凝药，抗凝成分是水蛭素衍生物(片断)，系一合成20肽，相对分子量2180。本品为凝血酶直接的、特异的、可逆性抑制剂。无论凝血酶处于血循环中还是与血栓结合，本品均可与其催化位点和阴离子结合位点(又称底物识别位点)发生特异性结合，从而直接抑制凝血酶的活性。本品对凝血酶的抑制作用是可逆而
短暂的，用于动脉粥样硬化引起的血栓病，安全性较好。
2. 研究内容和预期目标
比伐卢定(bivalirudin)在2000年经美国食品药品管理局批准上市,是直接的、特异的、可逆的凝血酶抑制剂,具有抗凝效果的可预测性、不诱导血小板减少及对纤维蛋白结合的凝血酶有效等优势。
学习多肽纯化的基础知识，掌握高效液相色谱的基本技能，设计比伐卢定的纯化方法，优化并获得定纯化的相关工艺参数，包括纯化的流动相的选择，纯化制备柱及填料的选择等。
具体的研究内容如下：
3. 研究的方法与步骤
1.研究溶解粗肽的时候是否需要加有机溶剂。
2.确定合适的溶解浓度：以纯水和乙腈为溶剂，称取同样量的粗肽，对应加入不同体积的溶剂进行溶解，其它条件一样，观察溶解后溶液的状态。
3.流动相的选择：tfa，硫酸钠，醋酸钠，teap，磷酸氨水。通过比较选用收率高效果最好的。
4. 参考文献
[1] 权菊香,王燕龙. 直接凝血酶抑制剂比伐卢定的研究现状[j]. 中国临床药理学杂志, 2012,28(3):231-233
[2] 俞纯红,沈利君,何敏. 反相高效液相色谱法测定比伐卢定的含量及有关物质[j]. 医药导报[j], 2008, 27(10):1258-1259
[3]姚程成,杨毅跃, 康国伟, 蒙相锋. 一种固相片段法合成比伐卢定的方法[p]. 中国专利，201210196621
5. 计划与进度安排
（1）2017-2-27~2017-3-12（第二、三周）在查阅文献资料的基础上，学习多肽纯化理论知识，写出开题报告。
（2）2017-3-13~2017-6-4（第四周到第十五周）学习和掌握高效液相基本操作，完成比伐卢定纯化实验及工艺参数优化。
（3）2022-6-5~2022-6-18（第十六到十七周）撰写毕业论文并准备答辩。
