开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、拟研究的问题
前期的研究中我们发现肾癌中有机阳离子转运体2（OCT2）的表达明显下调，DNA高甲基化是导致OCT2表达下调的原因之一。我们设计了DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨（DAC）与OCT2底物广谱抗癌药物奥沙利铂联合用药的方案，在裸鼠移植瘤实验中，该方案具有明显抑制肾细胞癌生长的作用。现有临床结果表明，该方案对肾癌晚期肺转移病人有明显的肿瘤抑制作用，但对于原发灶的治疗效果并不理想。本项目拟建立肾癌肺转移动物模型，并在该模型上对该DAC和奥沙利铂合用的给药方案进行验证，探究该给药方案在临床肾癌治疗中应用的可行性。
二、研究手段
采用慢病毒载体对人肾癌785—O细胞稳定转染萤火虫荧光素酶基因（luc），经筛选获得过表达萤火虫荧光素酶基因的人肾癌细胞株786-O-luc。将细胞悬液接种至高度免疫缺陷小鼠左侧腋部皮下，成瘤后待瘤块长至一定大小时，剥取肿瘤组织将瘤块原位移植到裸鼠肾内，构建原位移植瘤动物模型。应用动物活体荧光成像系统，监测荷瘤裸鼠肾脏的荧光信号并实时监测肺部的信号，通过荷瘤小鼠肺部荧光信号的变化判断肾癌肺转移动物模型建立是否成功。
肾癌肺转移动物模型构建成功后，采用地西他滨和奥沙利铂联合给药方案，通过活体成像技术、影像学分析以及组织染色等指标评价其对原位癌和转移癌的治疗效果。
二、文献综述
动物模型是指在调查与研究人类疾病期间，为了更好地理解疾病，并避免人体实验造成的危害使用的活的非人类动物。动物模型是认识生命科学客观规律的实验方法和手段, 广泛应用于生物医学、军事医学、生物工程、药品研发、外科整形等研究领域中。迄今为止, 全世界已建立有价值的动物模型超过5000种，主要涉及的实验动物包括:鼠、兔、犬、猴、猪、斑马鱼、树鼩、雪貂和羊等[1]。
2003年，美国NIH提出加快将基础研究的成果投入于临床应用的转化医学理念，并制定了由体外实验性治疗到动物实验，最终用于临床的实施步骤[2]。适当的动物模型弥补了实验室与临床的差距。理想的动物模型能够在很大程度上模拟人类疾病表型、病因、发病机制以及发展过程。例如在构建创伤性脑损伤的动物模型时，一般选用大型动物，尤其是猪、雪貂以及灵长类动物。其最突出的优势即与人类大脑的相似性。这种相似性不仅指形态、灰质和白质比率，还指发育模式、髓鞘化程度、脑血管解剖和生理学相似性[3]。但是患者与其疾病模型之间的差距通常是不可克服的 [4]。缺乏合适的动物模型是许多重大疾病发病机制解析、预防、诊断，预后标志物发现、药物筛选和评价、疫苗开发的重要瓶颈[5]。
在各类疾病的动物模型中，肿瘤动物模型是攻克肿瘤疾病这一个医学领域的世界性难题的重要工具。肿瘤动物模型为研究肿瘤的发病机制、生物学特性和检测各种治疗方法提供了一种高模拟性的工具。各式各样的肿瘤动物模型在约90%的肿瘤临床前研究中被采用，包括自发性模型、物理或化学因素诱导性模型、移植性模型以及转基因模型，其中移植性模型的应用最为广泛。转基因动物模型的发展日趋向上，例如肿瘤相关基因如APL等的插入、过表达及后缺失的肿瘤动物模型组用于验证白血病及靶向治疗的疗效[6]。
