开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 拟研究的问题
铁死亡是一种铁离子依赖的脂质活性氧聚集引起的细胞死亡，有研究发现铁死亡在调控肿瘤干性中发挥关键作用。SLC7A11为溶质载体家族成员之一，该基因编码胱氨酸/谷氨酸反转运体Xc系统的轻链亚基SLC7A11（又称xCT）。SLC7A11通过介导胱氨酸摄取促进谷胱甘肽的合成，保护细胞免受氧化应激，维持细胞的氧化还原平衡，阻止脂质过氧化诱导的细胞死亡。SLC7A11在多种恶性肿瘤中过表达，与胶质瘤、乳腺癌、卵巢癌、肝癌和肺癌等恶性肿瘤的生长、预后、转移密切相关，但其在调控胃癌细胞干性的作用尚不清楚。本课题旨在初步探索SLC7A11调控胃癌细胞干性的作用。
- 实验的主要内容
- 检测SLC7A11对胃癌细胞活性的影响
- 检测SLC7A11对胃癌细胞中肿瘤干细胞标志分子的表达的影响
- 检测SLC7A11对胃癌细胞成球能力的影响
- 检测SLC7A11对胃癌细胞中CD44 干性细胞群比例的影响。
- 实验方法
（1）通过MTT法检测过表达SLC7A11对胃癌细胞耐药活性的影响
在两种胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823中利用脂质体瞬时转染法转染SLC7A11过表达质粒，通过实时荧光定量PCR及western blot验证SLC7A11过表达效率。在细胞中加入铁死亡诱导剂Erastin，通过MTT法检测瞬时过表达SLC7A11的细胞SGC-7901 SLC7A11瞬 、BGC-823 SLC7A11瞬与各自阴性对照的细胞耐药活性差异。
（2）通过实时荧光定量PCR以及western blot检测SLC7A11对胃癌细胞中肿瘤干细胞标志分子的表达的影响
利用实时荧光定量 PCR 以及western blot检测 SGC-7901 SLC7A11瞬 、BGC-823 SLC7A11瞬细胞中肿瘤干性标志分子Oct3/4、ALDH1A1的转录水平及蛋白水平变化。以同样的检测手段检测通过慢病毒感染构建的SLC7A11稳定过表达细胞株SGC-7901 SLC7A11稳 、BGC-823 SLC7A11稳 中肿瘤干性标志分子Oct3/4、ALDH1A1转录水平及蛋白水平变化。明确SLC7A11可引起胃癌细胞中肿瘤干性标志分子表达升高。
（3）通过干细胞成球实验检测SLC7A11对胃癌细胞成球能力的影响
利用肿瘤干细胞微球体形成技术观察 SGC-7901 SLC7A11稳 、BGC-823 SLC7A11稳细胞形成肿瘤干细胞球的能力，间接验证过表达SLC7A11对胃癌干细胞样特性的影响。
（4）通过流式细胞术检测SLC7A11对胃癌细胞中CD44 细胞群比例的影响
