课题背景：
糖尿病在世界范围内发病率呈逐年升高趋势，常伴有广泛的并发症, 其死亡率也较高。糖尿病是一种以糖代谢异常为主要特征的内分泌代谢性疾病, 在临床上，外源性胰岛素或药物只能在一定程度上控制血糖, 延缓慢性并发症的发生。理想的治疗方法是胰腺或胰岛移植，阻止糖尿病的发展及并发症的发生。胰岛细胞移
植是治愈1型糖尿病的一种简单、安全、有效的理想方法，但目前临床疗效尚不理想，主要原因在于经分离和纯化后必须有足够数量的活性胰岛细胞以及防治移植后的免疫排斥反应[1]。我国血糖和代谢控制的现状与治疗指南的控制目标仍有较大差距，因此有必要进一步提高我国的糖尿病治疗和管理水平，其有效措施包括大力推广新的治疗策略和强化治疗，以预防晚期并发症的发生[2]。
胰岛的纯度和活性对胰岛移植治疗糖尿病的疗效有很大影响。优良的胰岛细胞是深入研究筛选有效的免疫抑制药物和其它抗排斥手段的前提和基础。啮齿类动物的胰岛细胞分离培养方法虽然已有建立，但分离、培养仍有待探索发现，并进行优化改进[3-6]。
胰腺分为外分泌部与内分泌部。外分泌部包括腺泡与导管。内分泌部则是由胰岛细胞构成。胰岛细胞则分为alpha;细胞，beta;细胞，delta;细胞，PP细胞，ε细胞。其中beta;细胞是能够合成以及分泌胰岛素，由此来调节体内的葡萄糖水平。beta;细胞与糖尿病的发生息息相关。
本研究的目的和意义：
对于糖尿病的治疗方面，胰腺移植被寄予厚望，在可移植胰岛的方面做了大量研究工作，为了更加有效彻底的治疗糖尿病，科研工作者们一直希望分离，得到可以被诱导产生新beta;细胞的胰腺干细胞。想要研究胰腺干细胞必须要在单细胞水平对胰腺进行研究，但是胰腺比较特殊，普通方法很难将胰腺组织彻底分散成活性较高的单个细胞，从而影响单细胞的分离和制备。
本研究在于摸索胶原酶Ⅴ对胰腺单细胞分离的优化，更有效的利用胶原酶，并得到较为理想的分离结果，通过将分离得到的小鼠胰腺单细胞在离体情况下进行增殖培养,对进行胰腺干/祖细胞实验的单细胞水平分析有积极意义[7]。
实验流程：
1.1试验用品的清洗和灭菌[8]
1.2实验所需溶液的配制及试剂分装
