1. 研究目的与意义
由于具有活性高、毒性较低以及功效好、安全可靠等特点，通过基因工程技术生产重组蛋白药物是新药开发的重点方向之一。
近年来，将人血清白蛋白与细胞因子融合表达是研发新型长效细胞因子类药物的一大发展趋势。
江苏泰康生物医药有限公司开发的人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子（i）融合蛋白（recombinant human serum albumin-mutated human granulocyte-colony stimulating factor, rhsa-mhg-csf，代号gw003）就是利用人血清白蛋白融合技术在毕赤酵母中表达长效重组蛋白药物。
2. 文献综述
elisa法定量分析发酵液中gw003浓度方法开发及验证董文静 160203217 南京中医药大学翰林学院摘 要：生物技术被认为是21世纪主导的高新技术，生物技术的药物大部分是多肽蛋白类药物1。
本文简述中的gw003属于长效蛋白类药物，主要用于肿瘤或者放化疗引起的细胞低下的症状。
蛋白质分子的化学结构2决定其生物活性，影响活性的结构因素主要为氨基酸及其排序、末端基团，肽链和二硫键位置等。
3. 设计方案和技术路线
1. 方法开发1.1精密度验证 1.1.1重复性 1.1.2中间精密度1.2 稀释线性与Hook效应1.3MRD确定及加标回收率验1.4 耐用性验证1.4.1改变孵育时间1.4.2改变孵育温度1.4.3﹣20℃过夜1.5 QC样品稳定性检测
4. 工作计划
2022.12.26-2022.01.01：分析方法调研及立项2022.01.02-2022.02.02：实际申购2022.02.03-2022.03.03：分析方法开发2022.03.04-2022.05.01：分析方法学验证2022.05.02-2022.05.31：撰写论文
5. 难点与创新点
本课题着眼于新药开发的重点方向之一：基因工程重组蛋白药物，针对GW003项目的ELISA法定量分析发酵液浓度，设计方法学验证方案，并进行方法学验证，对试验过程进行完整记录，并评判方法的适用性。
本论文的创新点有：1. 本方法验证所针对的药物GW003为新型人血清白蛋白-人粒细胞集落刺激因子（I）融合蛋白，能够有效防治骨髓抑制引起的白细胞减少症及骨髓衰竭病人的白细胞低下症；2. 本试验所针对的方法最低检测值LOD小，相对于对仪器要求较高的BLI、HPLC方法，具有更高的实验室可及性；3. 该方法准确度高、重现性好，方法开发和验证十分稳定，填补了GW003项目ELISA法定量分析发酵液浓度的空白，可用于产品的检验和放行，对于提高产品质量具有重大的意义。
