一、课题背景:血管抑制剂类抗肿瘤药物虽然在临床上取得了巨大的成功和销售利润,但其开发历史相对其他肿瘤化学治疗药物较短,其药理学研究还不够深入,非常有必要在其临床药理或临床前药理学方面进行深入的研究,以便为其更合理使用提供重要参考。
在给予血管生成抑制剂类抗肿瘤药物时,一定要考虑到肿瘤所处的阶段,只有在肿瘤发生发展恰当的时期给予相应的、恰当的抗肿瘤药物治疗,才可能达到预期的效果。
本试验建立了人非小细胞肺癌A549的裸鼠移植瘤模型,多西他赛为阳性对照药,评价了在肿瘤的晚期阶段(肿瘤体积>300 mm3)时给予有效剂量及过高剂量的HM-3,有效剂量的Avastin,有效剂量及过高剂量的Sunitinib,分析各个抗肿瘤活性。
前期已经探索了受试物产生药效作用的途径、频率和周期等。
二、实验目的:2.1探索人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤在体积>300 mm3时给予不同抗肿瘤药物的药效学。
2.2 熟练掌握细胞培养技术2.3 熟练掌握异种移植瘤模型建立的操作规程2.4. 熟练掌握小鼠尾静脉注射给药法及灌胃法三丶材料和仪器:3.1 实验材料人非小细胞肺癌细胞(A549) 本实验室保存细胞培养瓶 美国Corning公司3.2 实验仪器CO2细胞培养箱 美国Thermo公司倒置显微镜 上海测维光电技术有限公司液氮罐 成都西亚仪器有限公司超净台 苏州净化设备有限公司小型离心机 上海安亭科学仪器制造厂电子天平(d=0.01 mg) Sartorius BT25S电子天平(d=0.001 g) 上海舜宇恒平科学仪器有限公司JA2003pH计 上海康仪仪器有限公司全自动高压蒸汽灭菌锅 上海申安医疗器械有限公司血球计数板 上海求精生化试剂仪器有限公司烘箱 上海跃进医疗器械一厂PYX- DHS -X超纯水制造仪 成都超纯科技有限公司数显恒温水浴锅 国华电器有限公司3.3 主要试剂及配置3.3.1 主要试剂胎牛血清FBS(四季青) 浙江天杭生物科技有限公司青霉素/链霉素混合物 美国Sciencell公司DMSO Biosharp公司胰蛋白酶 Biosharp公司生理盐水 辰欣药业股份有限公司McCoys 5A 培养基 Life technologies公司3.3.2 主要试剂配置McCOYS 5A培养基 分别称取NaHCO3 2.2 g,青霉素 50 mg,链霉素 100 mg,McCOYS 5A干粉培养基1袋,加蒸馏水定容于1 L。
调节pH值至6.6~7.2。
0.22 mu;m过滤器过滤除菌。
PBS缓冲液 分别称取Na2HPO4 1.44 g,KH2PO4 0.24 g,NaCl 8.0 g,KCl 0.2 g,定容至1 L,121℃灭菌30 min。
胰酶消化液 称取胰酶0.25 g,EDTA0.02 g,溶解于100 ml PBS中,0.22 mu;m过滤器过滤除菌。
