1. 研究目的与意义
1、通过对黑荆树愈伤组织培养条件的研究,获取原花色素生长的较优条件,为获得高产量的原花色素提供有利的科学依据;2、通过对黑荆树愈伤组织的抗褐化培养,了解不同抗褐化剂与愈伤组织细胞生长率之间的关系,为今后寻找减轻或消除褐变的途径提供实验依据;3、利用植物细胞培养次生代谢产物的技术,能解决利用化学合成等技术手段中出现的污染、副产物等问题的出现。
2. 国内外研究现状分析
1986 年王敬文、蒋晶等在中国林业科学研究院亚热带林业研究所展开了脱落酸诱导黑荆树悬浮细胞抗冻性的研究,最终发现脱落酸(aba)能够诱导悬浮培养细胞可溶性蛋白质含量增高5.5倍,环己亚胺抑制低温驯化和aba诱导的抗冻性发育。
1993 年翟应昌、龚峥、周志坚等在广东省林业科学研究所展开了黑荆树愈伤组织和细胞悬浮培养试验,最终发现来源于下胚轴的愈伤组织经再分化培养能产生胚状体.悬浮细胞在附加2,4-dl的培养液中培养,以及高的细胞起始密度均有利于细胞的生长和增殖。
2014年唐佳佳、尚旭岚、洑香香等在南京林业大学森林资源与环境学院展开了黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究,最终发现黑荆树愈伤组织诱导能力顺序为叶片>下胚轴>茎段 黑荆树育苗技术、立体微型繁殖、茎尖培养技术的研究已有文献报道,但有关培养黑荆树愈伤组织生产原花色素这方面的研究几乎为空白。
3. 研究的基本内容与计划
内容:1、在黑荆树愈伤组织培养过程中,通过试验不同的继代培养基、蔗糖浓度、光照时长、继代次数这几个因素对原花色素含量积累的影响,从而得出黑荆树愈伤组织培养生产原花色素的较优条件;2、通过在继代过程中添加不同类型的抗褐化剂,对黑荆树愈伤组织进行抗褐化培养。
通过对黑荆树愈伤组织生长和次生代谢产物含量的测定,分析不同的抗褐化剂对黑荆树愈伤组织中次生代谢产物的影响情况;3、明确黑荆树愈伤组织中原花色素的提取方法;4、明确黑荆树愈伤组织中原花色素及生长量的测定方法。
计划:1、2015年12月-2016年1月查找、收集并阅读与所选课题相关的文献资料,为实验开展做好准备;2、2016年2月-2016年4月 撰写开题报告,进行黑荆树愈伤组织培养条件及抗褐化研究实验,并对愈伤组织生长量及原花色素含量进行测定;3、2016年4月-2016年5月对实验数据进行分析处理并总结,撰写毕业论文;4、2016年5月-2016年6月毕业论文交由指导老师审核、修改,准备毕业答辩。
4. 研究创新点
1、为今后寻找黑荆树愈伤组织培养中减轻或消除褐变的途径提供了实验依据; 2、为黑荆树中生物活性物质的开发与利用提供了基础。
