1. 研究目的与意义
木材,即树木次生木质部,包含各种从形成层原始细胞分化而来的细胞,如导管、射线细胞、木纤维、管胞。木材细胞中残留DNA是根据遗传物质鉴别木材树种的前提。研究DNA 降解程度最直接的方法是对木材中含有DNA的细胞器进行观察。DNA 提取是木材树种分子鉴别的第一步。但木材,尤其是心材中的DN A 在木材形成、心材形成、存储和加工处理 过程中逐渐发生降解,而且降解度不同,使得提取木材 DNA 很困难,并进一步影响到后续的扩增和测序。尽管目前已有大量成功提取木材 DNA的报道,但没有适用于所有木材 的 DNA 提取方法。对于一些木材而言,即使提取到DNA 也无法完成后续的扩增、测序等工作,因此,对木材进行初步判断尤其重要 ,准确的判断有助于选择合适的样品,并相应选择合适的提取方法。
2. 国内外研究现状分析
1.yantirachmayantiludgerleinemannolivergailingreinerfinkeldey等人分析了三种不同木材区的 dna 提取物的数量和质量, 即外边材 (无形成层或树皮),边材和心材过渡区和内心材。
从外边材到内心材, dna 数量正在沿着木材区域递减。
即边材外环内的dna 数量高于中环, 心材内圈最低.但是边材外环的 dna 质量高于中环, 而心材内环的含量最低.2.焦立超等人研究主要针对干燥处理的白木香木材,拟重点探讨dna 条形码技术在种水平上识别白木香木材的可行性,优选确定适用于识别白木香木材的 dna 条形码类型,并重点分析干燥处理对木材 dna 的影响。
3. 研究的基本内容与计划
研究内容: 研究不同储存时间的大叶榉木材dna的降解程度,本文选用大叶榉生材、一年气干材和长期气干材作为研究对象,以dapi,甲基绿,醋酸洋红作为遗传物质dna的染色剂,通过木材切片的手段,来统计分析木材中dna的含量和分布,为判断木材新鲜程度和选择合适的dna提取方法提供依据。
前期工作及具备的条件(经费、设备等):已有设备:木材组织切片机,刀片;光学显微镜;-20℃低温冰箱已有试剂:甲基绿粉末,醋酸洋红染液,磷酸缓冲液,戊二醛样品来源:南京林业大学立木,南京林业大学木材标本经费:500元研究计划:① 试样制备。
将试样从木材中切下,浸入2.5%戊二醛固定液,4℃24h,;0.2m/l 磷酸缓冲液洗涤4次每次 20min ;② 切片。
4. 研究创新点
通过组织化学方法研究 DNA 在木材中的数量和分布,为快速选择合适的DNA 提取方法提供依据,探索解决无法判断木材新鲜程度而盲目提取木材 DNA的问题。
