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1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
研究意义
葡萄在植物分类学上属于葡萄科葡萄属,为落叶藤本植物,是世界最古老的植物之一,并且是一种经济价值比较高的植物。
果实品质是衡量果实观赏价值和食用价值的重要因素之一[6],果皮的着色情况是葡萄外观品质的一个重要指标,葡萄果实的着色状况对鲜食葡萄意义重大,直接关系到葡萄的商品价值,而葡萄果皮中花色苷含量直接决定了葡萄的着色度[1]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
通过不同浓度的aba、abai处理葡萄果实,明确aba对葡萄果实类胡萝卜素、花色苷代谢的影响;同时通过处理找出合适的调控浓度,为生产上提供有效的理论和实践依据。利用科学方法使葡萄达到高产,优质,高效的目的,对于满足市场经济需求。
研究内容
3. 研究的方法与方案
实验方案
本次实验中以‘巨玫瑰’为试材,设定7种处理(3种不同浓度的ABA、3种不同浓度的ABAI、1个ck)来对‘巨玫瑰’葡萄进行处理,研究其对葡萄相关品质果实发育的影响。且找到合适的调控浓度,为生产上提供有效的理论和实践依据。
研究方法
1)ABA处理:在葡萄果实着色初期,分别将已选取的六组葡萄分别用不同浓度的三种ABA与不同浓度的三种ABAI进行处理,分别标号,处里后按规范技术正常管理。
2)采样:分别于花后40d,60d,80d,100d采样。 不同处理和对照果穗上采取果粒。兼顾果穗不同位置。
3)测定指标:果实品质包括单果重,可溶性固形物含量和可滴定酸含量等。葡萄果皮着色取决于果实花青素、叶绿素、类胡萝卜等的含量。测定方法如下:
单果重(g):采用分析电子天平称量。
可滴定酸:将葡萄果实去皮,取不同部位果肉, 容量瓶中定容, 取定容的果汁,加两滴酚酞,用以标定的0.1 mol/LNaOH溶液滴定至浅粉红色(1 min内不褪色)。
计算方法:酸度(%) =cvkX(100/10)X100/m
可溶性固形物(Brix%):采用手持糖量计测得, 取果穗,取平均值。
叶绿素测定:称取叶片,剪碎,加 95%乙醇溶液,封口,喑处提取24小时,浸泡后进行测定,类胡萝卜素的测定方法类似。
花青素测定:称取果皮(环剥果实取中间果实的果皮),剪碎,加盐酸一IH醇溶液,封口,暗处提取12-24小时,浸泡后进行测定。
RNA提取及cDNA获得:采用CTAB法提取RNA,同时采用试剂盒反转录。
定量测定:测定VvUFGT、VvF3H、VvLDOX、VvPSY等基因的表达变化。
技术路线:
可行性分析:
葡萄是6月初中旬开花,在7月6日 果实转色期进行ABA处理。
以“巨玫瑰”葡萄为试验材料,用不同浓度的ABA进行处理,研究了在不同浓度ABA处理后,对花青素含量,果实纵横径,单果重,可溶性固形物含量以及可滴定酸的影响。结果表明使用ABA处理可以显著改善果实着色,且随着ABA浓度的增大花青素含量增大。所以:
(1)ABA处理促进葡萄果实成分中花青苷的含量从而提高糖含量,提早果实成熟着色。
(2)ABA各处理降低了果实的可滴定酸含量和增加了果实的可溶性糖含量,促进了果实中酸的降解和可溶性糖的积累,有利于果实品质的改善。
(3)ABA在物质的转运和促进光合产物向“库”中积累起重要的作用
4. 研究创新点
ABA 增加果实含糖量与 ABA 加快果实成熟进程有关,葡萄果实的成熟过程中,脱落酸含量急剧上升,并随果实成熟不断增加,有些果实成熟过程中,脱落酸峰值出现早于乙烯峰值,研究证实,在草莓成熟过程中,外源脱落酸促进乙烯生成。促进了糖分的积累。外施乙烯促进葡萄成熟,要在脱落酸含量达到一定程度才能发生,采后番茄成熟过程中,外源 ABA 处理使果皮内 ABA 含量显著增加,促进果实成熟(阮英,2005),本研究发现,ABA 在促进花色素积累的过程中,可溶性固形物,可滴定糖含量增加,而可滴定酸含量减少,这与很多前人研究结果相同,葡萄使用 ABA 后发现,ABA处理增加了果实可溶性固形物,可滴定糖含量,降低了可滴定酸含量,而且浓度越高,效果越明显。成熟时期有促进作用还可以改善葡萄品质,可以广泛用于葡萄的着色。
通过ABA及ABAI抑制剂处理,效果对比更加显著。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
以‘巨玫瑰’为试验材料采用不同浓度的aba和abai试剂来进行处理,找出合适的调控浓度。
