1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.本课题研究意义
1.1 14-3-3蛋白的概述
14-3-3s是生物中一组保守的相对分子量低的酸性二聚体蛋白质。尽管缺乏催化活性，但已证明这些蛋白质参与多种细胞过程[1]。真菌14-3-3在多种细胞过程中有蛋白定位、相互作用、转录调节等作用，包括dna复制、细胞周期、蛋白质运输或分泌、细胞凋亡自噬、应激下的细胞活力、基因表达、主轴定位及碳代谢[2]。因此，真菌能帮助我们认识14-3-3蛋白质在细胞生理学中的重要性。
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2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标
在前期发现14-3-3蛋白能够通过影响胞内ros、no信号转导途径，从而对灵芝关键次级代谢产物灵芝三萜生物合成具有重要调控作用的基础上，研究14-3-3与ros信号途径关键蛋白napdh氧化酶和no信号途径关键蛋白硝酸还原酶的相互作用。
2.研究内容
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3. 研究的方法与方案
1菌株、质粒、试剂及菌株培养
1.1菌株、质粒、试剂
灵芝（g.lucidum）菌株g20由上海农科院提供。溶壁酶购自广东省微生物研究所、taq dna polymerase、限制酶、t4 dna ligase购自大连takara公司。所用到的抗生素均购自上海生工生物工程公司，其它试剂均为分析纯。
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4. 研究创新点
目前关于14-3-3蛋白的研究主要集中于哺乳动物方面，但关于大型担子菌中14-3-3蛋白的研究在国内外还少有报道。本课题以研究灵芝中14-3-3蛋白对灵芝生长及三萜合成的影响为目的，为研究14-3-3蛋白在大型担子菌中的作用提供数据。
5. 研究计划与进展
2018.09-2018.10熟悉实验室基本情况，查阅相关文献；
2018.10-2018.11查阅相关文献，向师兄师姐学习基本实验操作，做一些预实验，进行实验条件的摸索；
2013.11-2019.03构建nox和nr载体。
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