木聚糖酶的表达与纯化开题报告

 2022-01-23 20:35:51

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

木聚糖(xylan)是一种存在于植物细胞壁中的异质多糖,约占植物细胞干重的15%~35%,是植物半纤维(hemicellose)的主要成分。

大多数木聚糖是一种结构复杂的、具有高度分枝的异质多糖,含有许多不同的取代基。

木聚糖的生物降解也因此需要一个复杂的酶系统,通过其中各种组分的相互协同作用来降解木聚糖。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标:将木聚糖酶表达并纯化研究内容:木聚糖酶在质粒中表达,并被提取和纯化拟解决的关键问题:1.木聚糖酶在质粒中表达量低,无法被提取。

2.分离纯化的不是目标蛋白。

3. 研究的方法与方案

研究方法:1.xylanase in pet-ntmst 质粒转入rosetta 铺平板,37℃过夜。

2.从lb平板上挑菌落,接种在50ml的lb平板上,37℃培养,过夜。

3.410ml的上述菌液接种在41000mL的lb中,37℃培养至od600为0.6~0.8,加0.5mmiptg诱导过夜。

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4. 研究创新点

特色或创新之处: 用亲核层析法分离纯化木聚糖酶,从而获得高纯的木聚糖酶,目前还未有人做过相关的实验来研究木聚糖酶。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展分三个阶段:1.从2016年11月到2017年1月a.查阅相关文献;b.设计实验方案。

2.从2017年2月到2017年4月a. 进行实验3. 2017年5月a.撰写论文;b.进行毕业答辩。

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