四氢叶酸依赖型的麦草畏脱甲基酶基因外源表达、纯化和特性研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题研究意义

通过了解降解麦草畏的机理，分析克隆到的四氢叶酸依赖型脱甲基酶的基因，找到降解酶所对应的基因，并对性能优良的基因进行克隆，后使基因在外源进行表达，大量表达之后破碎细胞，将大量表达的目的蛋白质分离提取出来，并验证表达产物的生物学活性，即可用于对环境中残留的麦草畏进行降解。

2 国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

1 研究目标、内容

确定研究所使用菌株、质粒，随后进行培养。通过基因序列分析，提取16s rrna pcr产物，克隆，酶连，转化。构建载体，表达，最后对破碎细胞得到的表达产物进行纯化和分析。

2 拟解决的关键问题

3. 研究的方法与方案

1 研究方法总结实验方案路线（如图）

2 可行性分析

4. 研究创新点

提取(克隆)到四氢叶酸依赖型脱甲基酶基因，不同于已经报道过的麦草畏脱甲基酶基因，为实验的创新之处。

5. 研究计划与进展

① 2016年10月-11月：确定所用菌株、质粒、目的基因、引物等，并着手开展实验

② 2016年12月-2017年2月：进行克隆、酶切、同源重组、转化等工作

③ 2017年3月-2017年4月：得到表达产物，进行纯化，验证产物活性，并进行分析