1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
一、本课题的意义硒是人体内非常重要的一种微量元素，参与人体许多组织中的重要代谢，与人类生命健康密切相关。
有机硒补剂特别是富含硒代氨基酸的产品在毒理安全性、生理活性和吸收率上具有优越性，因此这类产品的开发与研究一直广为关注。
杏鲍菇（pleurotuseryngiiquel）是近年来开发栽培成功的集食用、药用于一体的珍稀食用菌新品种，且具有良好的富集微量元素的作用。
2. 研究的基本内容和问题
一、研究目标和内容：1. 测定菌丝体生长指标，分析不同培养方法下菌丝体的耐硒能力2. 测定总硒含量以及有机硒含量，分析不同培养方法下菌丝体富硒能力3. 通过联用技术对硒代氨基酸的不同形态以及不同形态硒代氨基酸的含量作出分析二、拟解决的关键问题：1.富硒杏鲍菇的培育条件探索2.富硒杏鲍菇中不同形态硒的提取、分离方法技术3.富硒形态分析方法的研究和建立
3. 研究的方法与方案
一、研究方法：1.硒含量测定技术：1.1提取方法：微波消解法、硝酸消解法1.2测定方法：ICP-MS技术2.形态分析技术：2.1提取方法：超声辅助酶XIV法2.2检测方法： HPLC-ICP-MS联用技术二、技术路线：见附件三、实验方案：3.1生长情况：3.1.1菌落直径（平板培养）：每隔一天测定3.1.2菌落生长速率（平板培养）：菌落生长速率(mm/d)=菌落最终直径/生长天数3.1.3生长抑制率（平板培养）：生长抑制率(%)=（对照净生长量-处理净生长量）/对照净生长量1003.1.4生物量（液体培养）：生物量(g/L)=菌丝干重/发酵液体积3.2硒含量及形态分析（液体培养）：3.2.1总硒：0.3000g样品 8mL浓硝酸 微波消解ICP-MS 3.2.2 BCF：BCF=硒含量生物量10-3/培养基硒浓度3.2.3有机硒：有机硒=总硒无机硒；无机硒采用环己烷萃取法3.2.4有机化率：有机化率（%）=有机硒/总硒3.2.5 硒形态分析：采用HPLC-ICP-MS法：Hamilton PRP-X100 阴离子交换柱( 250 mm4. 6 mm，10μm) ；流动相A: 5mmol/L柠檬酸，B: 15mmol/L柠檬酸，pH均为4.7（20% 氨水调节）；洗脱条件：0～6min: 100; 6～10min: 50% A; 10～15min: 100%B; 15～20min: 100% A, 20～23min: 100% A. 流速: 1.0 mL /min，进样量: 50 μL。
样品前处理：超声辅助酶解（酶XIV）四、可行性分析：1. 杏鲍菇是良好的富硒载体，利用杏鲍菇转化无机硒具有可行性；2. 菌丝体生长指标测定已建立科学方法，耐硒能力分析具有可行性；3. 超声辅助酶XIV法可有效分离提取硒代氨基酸；4. 总硒含量和有机硒含量的测定技术已经成熟；5. HPLC-ICP-MS联用技术在食用菌中硒元素形态分析领域得到广泛应用， 利用该方法进行杏鲍菇菌丝体的形态分析具有可行性。
4. 研究创新点
一、特色或创新之处有机硒补剂是近年来的研究热点。
杏鲍菇是近年来开发栽培成功的集食用、药用于一体的珍稀食用菌新品种，因其有杏仁的香味和菌肉肥厚如鲍鱼的口感，深受人们喜爱。
目前，有关以杏鲍菇为载体获得有机硒的研究非常少，富硒杏鲍菇的研发和生产应用，无疑会深受广大消费者喜爱，因此，本实验的研究具有鲜明特色和显著创新。
5. 研究计划与进展
一、研究计划及预期进展：2015年10月～2015年12月：菌种活化、富硒杏鲍菇的培养和菌丝体生长指标测定2016年1月～2月：菌丝体样品的制备2016年3月～4月：菌丝体硒含量的测定、硒形态样品的制取和形态分析2016年4月～5月：数据处理和分析和毕业论文论文写作
