1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
重金属污染对生态系统造成严重的影响, 已成为全世界所关注的问题。
在众多重金属污染物中, cd2 已成为对人类和生物影响最大最直接的物质。
研究表明过量重金属可改变植物的代谢机制, 破坏酶系统的生理功能, 使植物生长变弱, 引起植物的死亡[1]。
2. 研究的基本内容和问题
研究内容:外生菌根菌对重金属的耐性筛选、菌根化松树幼苗培育:通过纯培养试验,比较40余种外生菌根菌对重金属(cd)的耐性,从中挑选cd耐性菌株.外生菌根真菌cd耐性锻炼: 挑选出来的耐性菌株通过固体培养,测出它们的半抑制浓度,然后连续在半抑制浓度下生长2个月。
耐性检测:通过固体和液体培养的方式检测耐性锻炼前后菌种的耐性。
研究目标: 通过cd耐性锻炼的形式,试验能否以耐性锻炼的形式提高外生菌根真菌的重金属耐性从而来提高外生菌根真菌-植物这个体系对重金属的耐性。
3. 研究的方法与方案
研究材料:菌株:40多种外生菌根真菌菌株(mmn纯培养)species isolates species isolatesamanita pantherina 1 peziza ammophila 1amanita virgineoides 1 pisolithus albus 1astraeus hygrometricus 1 pisolithus sp. 3boletus cf. rubellus 1 rhizopogon sp. 7boletus reticulatus 1 rhizopogon superiorensis 1cenococcum geophilum 2 rizopogon rubescens 2cortinarius purpurascens 1 russula pectinatoides 1cortinarius sp. 1 russula sanguinaria 1gautieria sp. 1 russula sororia 1hebeloma leucosarx 1 russula violeipes 1hebeloma mesophaeum 1 scleroderma areolatum 1hebeloma pusillum 1 scleroderma bovista 1hebeloma sp. 1 scleroderma citrinum 1hymanogaster sp. 1 strobilomyces strobilaceus 1hysterangium sp. 1 suillus bovinus 3inocybe lacera 1 suillus granulatus 2laccaria amethystea 1 suillus luteus 2laccaria laccata 2 suillus placidus 1laccaria murina 1 tricholoma imbricatum 1laccaria sp. 1 tricholoma matsutake 1lactarius akahatsu 1 tricholoma robustum 1lactarius hatsudake 2 tylopilus castaneiceps 1leccinum scabrum 1 xerocomus subtomentosus 1lyophyllum shimeji 1 待确定种 13*有阴影的菌株分离自侵染松树的外生菌根菌重金属种类:非营养金属元素(cd)、微量营养元素(cu)技术路线:研究方法:菌株耐性筛选试验: 选择实验室纯化保存的31种外生菌根真菌,分别配置含有90mg/l的cd和cu固体mmn培养基;用打孔器取固体mmn培养基上培养的菌斑(外沿生长活跃部分,直径1cm),放置于上述添加了cu、cd的固体mmn培养基的培养皿内,25℃暗培养,通过测量菌斑直径的变化,分别选择cu、cd耐性菌株。
耐性菌株的cu、cd半抑制浓度测定:设置一系列cu、cd mmn固体培养基,对第一步筛选的菌株进行细筛,每种浓度的cu、cd平板上放置一块1cm直径的菌斑,每种浓度重复3次,每隔3天利用十字交叉法测量直径,直到直径趋于一致。
作图算出各自的cu、cd半抑制浓度。
4. 研究创新点
通过阅读文献,很多文献都指出了从污染地采集的外生菌根真菌的重金属耐性高于非污染地的,但是还没有文献开展耐性锻炼方面的工作,本实验的特色和创新之处就在于尝试着在短时间对外生菌根真菌进行驯化,从而为其对污染的治理提供更大的潜能。
5. 研究计划与进展
2014.1-2014.4菌株的耐性锻炼2014.5毕业论文的撰写
